歯根膜におけるメカノ・ケミカル機構の解明―直交する二つの細胞外線維の考証―

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K09502
• Research Institution: Hirosaki University
• Principal Investigator: 敦賀 英知 弘前大学, 保健学研究科, 教授 (30295901)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 岡 暁子 福岡歯科大学, 口腔歯学部, 准教授 (60452778)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 歯根膜

Outline of Annual Research Achievements

歯根膜にはエラスチンの伴わない弾性系線維であるオキシタラン線維が存在する。歯根膜のオキシタラン線維の走行は歯軸に平行に存在する。細胞外線維の代表であるコラーゲン線維（Ⅰ型コラーゲン線維）の歯根膜における走行はオキシタラン線維と交叉し、ほぼ直交するように観察される。これは歯根膜における特徴的なもので、肺胞においてもオキシタラン線維と弾性系線維は存在するがその相互の位置関係には規則性は報告されていない。そこで細胞培養系を用いて、オキシタラン線維とコラーゲン線維の位置関係を解析する。細胞は歯根膜線維芽細胞と肺胞線維芽細胞を用いて、免疫染色を行った。細胞膜因子の解析により歯根膜線維芽細胞と肺胞線維芽細胞においてインテグリンαVとβ３およびα５とβ１が相互に関与してオキシタラン線維とコラーゲン線維を補足していることを踏まえて、歯根膜線維芽細胞と肺胞線維芽細胞の培養細胞・細胞外基質層を回収し、細胞内因子（①talin ②vinculin ③actinin）の解析を行った。メカノ-シグナル系の①talin ②vinculin ③actininについて両細胞の発現の差異をウェスタンブロットにて半定量解析を行った。その結果、三分子においては歯根膜線維芽細胞と肺胞線維芽細胞間の差異は観察されず、メカノ-シグナル系がオキシタラン線維とコラーゲン線維の走行の規則性には反映していない可能性が示された。その再現性を確認するとともに、ケミカル-シグナル系の解析のための検出条件を確立している。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

オキシタラン線維とコラーゲン線維の走行の位置的解析に引き続き、メカノ-シグナル系の解析が終了したので、ケミカル-シグナル系の解析に進み、ベースラインを確立する。

Strategy for Future Research Activity

オキシタラン線維とコラーゲン線維の走行の位置的解析のために、歯根膜線維芽細胞におけるメカノ-シグナル系とケミカル-シグナル系を確立する。

Causes of Carryover

購入した抗体が当初の予定より効率よく使用できたために、購入予定数よりも少なく済んだことから次年度使用額が生じた。次年度使用額分は細胞培地等の消耗品に用いる予定である。