2022 Fiscal Year Annual Research Report
Mechanism of CX3CL1-mediated invasion of osteoclast progenitor cells through the osteoblast layer in inflammatory diseases.
Project/Area Number |
18K09532
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Research Institution | Tokyo Medical and Dental University |
Principal Investigator |
立川 敬子 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 准教授 (70236537)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中浜 健一 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 准教授 (60281515)
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Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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Keywords | CX3CL1 / 破骨細胞前駆細胞 / 細胞内カルシウム濃度 / 骨芽細胞 |
Outline of Annual Research Achievements |
今年度は、骨芽細胞とOPCの接触により破骨細胞分化因子であるRANKLとその受容体RANKの結合について検出する試みを行なった。RANKL、RANKそれぞれにnanoBiT(ルシフェラーぜ活性を持つ)のN末側とC末側を融合タンパクとして別々の細胞に発現させ、それらの細胞を共培養し基質を添加したところ発光が検出できた。さらに、本実験系にRANKLに対する中和抗体を添加したところ、著明な発光抑制が見られた。このことから、RANK-RANKLの特異的な結合が検出できたと判断した。本結果は、生細胞でのRANK-RANKL結合の検出を可能とし、骨粗しょう症に対する薬剤のスクリーニングに応用できる重要な発見である。
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