2020 Fiscal Year Annual Research Report
Molecular biological analysis and investigation of diversity regarding the de novo virulence factors associated with oral streptococcal infections
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18K09560
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
高橋 幸裕 日本歯科大学, 生命歯学部, 教授 (00281436)
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2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 口腔レンサ球菌 / アドヘジン / 多様性 / バイオフィルム / 病原因子 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
申請者らは、う蝕と歯周病、さらには感染性心内膜炎など歯性感染症の原因となる口腔バイオフィルム（デンタルプラーク）形成の初期に歯に付着する口腔レンサ球菌のHsaアドヘジンを同定した。このホモログ（類似タンパク）の多様性がその後の研究および申請者らの予備実験により明らかになった。この研究の目的は、Hsaを含むこれらアドヘジンの多様性を解明することである。これら多様性の解明は、初期口腔バイオフィルム形成に関わる分子間結合様式の解明に寄与し、新たなプラークコントロール法の開発およびデンタルプラークをサンプルとした口腔バイオフィルム形成能および感染性心内膜炎病原性を評価する手段として臨床応用できる可能性を示すことを、この研究の最終的な目標とする。
口腔サンプルからヒト口腔に常在するレンサ球菌の分離を行い、同定キットによる解析および16S rDNA 塩基配列の解析により菌種を同定した。その結果、2018年度及び2019年度に合計約100株、2020年度ではさらに約80株の口腔レンサ球菌を分離、同定した。あわせて約180株の口腔レンサ球菌について、Hsaホモログの検出を、抗体を用いたドットブロット法により行い、ヒト赤血球に対する凝集活性を測定した。さらに、Hsaの非繰り返し領域（NR2）のシークエンス解析を行った。その結果、HsaのNR2領域は、赤血球凝集活性に何らかの関連があること、Streptococcus gorodonii と同定された株でHsaのホモログが存在する可能性が高いことが明らかになった。また、S. gorodonii 株はHsaホモログの保有率が他の菌種より高い傾向にあるが、NR2類似抗原は他菌種に比べて顕著に多いとは言えず、NR2領域のシーケンス解析でも多様性を持つことが推測された。したがって、NR2領域内でのシアル酸結合に関与する特定の配列の存在が示唆された。
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