2020 Fiscal Year Annual Research Report
Identification of Metastasis-specific miRNAs and Establishment of Diagnostic Methods Focusing on Cancer Stem Cells and Blood of Patients with Oral Cancer Metastasis
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18K09745
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| Research Institution | The University of Tokushima |
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Principal Investigator |
高丸 菜都美 徳島大学, 病院, 講師 (40513031)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
宮本 洋二 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (20200214)
玉谷 哲也 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 非常勤講師 (30274236) [Withdrawn]
中川 貴之 広島大学, 病院(歯), 助教 (30456230) [Withdrawn]
大江 剛 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 徳島大学専門研究員 (60432762) [Withdrawn]
真野 隆充 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 徳島大学専門研究員 (80325125) [Withdrawn]
栗尾 奈愛 徳島大学, 病院, 講師 (80622141)
工藤 景子 徳島大学, 病院, 講師 (70380029)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | microRNA / 口腔癌 / 癌幹細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
口腔癌の転移特異的なmicroRNAの同定を本研究の目的とする。転移特異的な候補miRNAの選定法として２つの提案がある。第１は同一癌患者の①術後非担癌状態時の血液と，②頸部リンパ節，遠隔転移時の血液を用いアレイ解析して候補miRNAを得る。第２は、癌幹細胞に着目した方法である．これらをB88細胞に導入して癌幹細胞様細胞を作製し，親細胞と解析を行い，候補miRNAを得る．候補miRNAは上記モデルを用いて検証して，口腔癌の転移に特異的なmiRNAを同定する。
研究実績としては以下のことを行った。
Ⅰ．口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNAの選定と同定．１）口腔癌患者の血液に着目した転移関連miRNA候補の探索と選定．２）上記で選定した転移に関連する候補miRNAの検証による転移特異的miRNAの同定
1）よりmiRNAを探索したところ2632抽出され、そこから8倍以上上昇されたmiRNAが140、8倍以上低下したmiRNAが129に絞った。ここから更に過去の論文より癌の転移や予後に関与するものなどで検索をかけ、さらに6つに絞り込んだ。６つの候補を患者の血清中のmiRNAの発現量を測定したところ、４つで再現性が得られ、転移に関連するmiRNAを同定した。
Ⅱ．癌幹細胞に着目した転移関連miRNAの選定と同定．１）口腔癌組織における癌幹細胞マーカー発現の検索．２）ALDH1とSOX2を発現させた癌幹細胞様細胞株の樹立．３）癌幹細胞に特異的な転移に関連するmiRNA候補の探索と選定．４）上記で選定した転移に関連する候補miRNAの検証による転移特異的miRNAの同定
１）において口腔癌組織における癌細胞マーカーALDH1とSOX2の発現を確認した。
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