Role of TPD52 as a suvival factor on OSCC cells in a hypoxic condition

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K09798
• Research Institution: Showa University
• Principal Investigator: 椋代 義樹 昭和大学, 歯学部, 助教 (50325099)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 伊藤 千洋 昭和大学, 歯学部, 助教 (20783062) [Withdrawn] ; 山田 篤 昭和大学, 歯学部, 講師 (50407558) ; 代田 達夫 昭和大学, 歯学部, 教授 (60235760)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: TPD52ファミリー / 扁平上皮癌 / ｍRNA安定性 / 転写後遺伝子発現調節 / 翻訳後修飾 / Hypoxia / オートファジー

Outline of Annual Research Achievements

申請者らはTPD52を口腔扁平上皮癌細胞にける新規の分子標的治療因子としての仮説を立て、特に、低酸素条件下における口腔扁平上皮癌細胞のネクローシス・アポトーシスやオートファジーをHIF-1経路に関係して制御する重要なタンパクとしての役割を検索するため、本研究計画を着想するに至った。そこで本研究計画では「低酸素状態の口腔扁平上皮癌細胞におけるTPD52の細胞生存因子としての役割の検索」を目的としてを4カ年にわたる研究計画を策定した。そのうち、今年度は以下の研究を行っている。
・in vitroにおいての低酸素下条件におけるTPD52遺伝子の発現の変化の検索：扁平上皮癌細胞株であるSAS細胞を用いて、低酸素下にけるTPD52の発現に対する影響を検索している。すなわち、TPD52が最も強く発現誘導される条件を、酸素分圧、低酸素曝露時間を様々に変化させて検討している。また、TPD52遺伝子の発現は、転写、転写後発現調節（mRNA安定性の変化など）、翻訳後発現調節（リン酸化など）によって複雑に調節されているため、mRNA転写の検索、総mRNA量の検索、mRNAの安定性の検索などを同時に行っている。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

今年度に予定した研究計画は、若干の遅れがあるものの、ほぼ順調に遂行されている。すなわち、研究計画に従って、現在のところ、扁平上皮癌細胞株であるSAS細胞を用いて、低酸素下にけるTPD52の発現に対する影響を検索している。また、SAS細胞におけるTPD52のmRNA転写活性の検索、総mRNA量の検索、mRNAの安定性の検索、および、総タンパク質の発現および翻訳後修飾の検索を行っている。

Strategy for Future Research Activity

研究計画に沿って、以下の研究を2019年度に実行する予定である。
・低酸素状態でTPD52の誘導がみられた条件において、その誘導効果がHIF-1aに依存しているかどうかを検索する。
・ 申請者らは既に、SAS細胞にGFP-TPD52を恒常的に強制発現した細胞株、ならびに、EmGFP-TPD52shRNAを用いて恒常的にノックダウン細胞株を樹立している。これらの細胞株を用いて、低酸素条件下におけるTPD52とHIF-1の発現との関連をさらに詳細に検討する。

Causes of Carryover

予想より試薬の購入が少なかったため。なお、繰り越したものは、研究計画に従い、各種試薬や実験動物購入等、次年度以下の物品購入に充当する。