2019 Fiscal Year Research-status Report
Metastasis-related microRNAs in oral squamous cell carcinoma
| Project/Area Number |
18K09816
|
|---|
| Research Institution | Ehime University |
|---|
Principal Investigator |
徳善 紀彦 愛媛大学, 医学部附属病院, 助教 (10723843)
|
|---|
| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
|
| Keywords | microRNA / リンパ節転移 / 口腔癌 |
|---|
| Outline of Annual Research Achievements |
合成miRNAを用いてmiR-375の発現変動における細胞増殖抑制効果についてWST-8 Assay を行い検討を行った。その結果、原発巣から樹立した細胞株ではmiR-375を強制発現すると軽度の細胞増殖抑制効果を認めることができた。しかしながら転移巣由来の細胞株ではmiR-375を強制発現を行うも、細胞増殖抑制効果は認めなかった。LNA-miR-375を用いて発現抑制における細胞増殖能について検討を行ったが、コントロールとして使用したLNA-miR-nonTargetの細胞毒性が強く、適切な評価はできなかった。
腫瘍組織におけるmiR-375の発現と予後との関連についてリアルタイム定量化RT-PCR法およびカプランマイヤー解析を行い検討を行った。RT-PCR法で各症例のΔCT値を算出し、カットオフを中央値で設定し、miR-375高発現群、低発現群の2群に設定した。その結果、高発現群と比較し、低発現群においては有意に予後不良であった。
|
| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
基礎実験としてLNA-miR-NTのデザインを変更したりするなど、細胞毒性を回避する事を行っていたが、なかなか結果としては現れなかった。
|
| Strategy for Future Research Activity |
in vitro の実験としては今後は浸潤能および遊走能についての実験を検討している。またLNAの毒性を回避するために、現在まではLipofectamin RNAiMAXを使用していたが、別のトランスフェクション試薬もしくはトランスフェクション試薬なしでの実験についても検討していく予定である。
|
| Causes of Carryover |
合成核酸の購入などに使用する予定です。
|
