ラジカル捕捉剤edaravoneと脂肪幹細胞分泌物によるX線誘発唾液腺障害の軽減

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K09824
• Research Institution: The Nippon Dental University
• Principal Investigator: 那須 優則 日本歯科大学, 生命歯学部, 教授 (50130688)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 堀江 哲郎 日本歯科大学, 生命歯学部, 講師 (10508675) ; 三橋 扶佐子 日本歯科大学, 生命歯学部, 助教 (60187896) ; 井出 吉昭 日本歯科大学, 生命歯学部, 准教授 (70409225)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 唾液腺 / 放射線傷害 / 防護作用 / エダラボン / secretome

Outline of Annual Research Achievements

頭頸部の放射線治療による唾液腺実質の破壊は、唾液成分の合成と分泌の低下をおこし、様々な口腔内疾患の原因となる。そのために放射線障害の早期軽減は重要であり、本研究計画ではラジカル消去剤であるエダラボンおよびsecretome の放射線防護効果を調べることを目的としている。X線やγ線により生じたラジカルが放射線障害の原因であるが、エダラボンは国内で医薬品として認可された唯一のラジカル消去剤（ラジカルスカベンジャー）であり、その軽減効果が期待される。
前年度、我々はラット顎下腺由来細胞株RSMG-1に対するエダラボンの放射線防護効果について調べた。無血清培地であるMCDB153培地を用いて培養したRSMG-1にエダラボンを添加し、1時間後に1又は3GyでX線を照射した。照射後、エダラボン非添加培地で48時間培養し各種解析をおこなった。結果的にはエダラボン添加による明らかな細胞障害軽減作用は認められなかった。しかしエダラボンは投与量によって細胞毒性が生じる可能性が報告されている。そこで申請者は投与方法について検討するために、当該年度においては、試験に用いるRMSG-1細胞の性状解析を行った。
RSMG-1はコラーゲン中において肝増殖因子(Hgf)存在下で導管様細胞に分化することがわかっていることから、幹細胞または前駆細胞の性質を持っていると考えられた。そこで遺伝子発現解析を行ったところ、唾液腺幹細胞のマーカー遺伝子の一つであるK5が高発現していることが分かった。さらにこれらの遺伝子発現について調べるために、現在、RSMG-1群とRSMG-1Hgf添加群について次世代シークエンサーを用いたRNA-seq解析を行っている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

前年度の計画通り、我々はRSMG-1細胞の性状解析を行うために、遺伝子発現解析を行っている。その結果として、RSMG-1は顎下腺の導管前駆細胞であるK5を非常に強く発現していることを明らかとし、RSMG-1はそのモデル細胞として有用であることを確信できた。またさらに網羅的に遺伝子発現を調べるためにRSMG-1細胞とそのHgf添加群のRNAseq解析を行っている。データの取得はすでに完了しており、データ解析中である。
計画は順調に進んでいるものと判断できる。

Strategy for Future Research Activity

1. RSMG-1およびその添加群の遺伝子発現データの解析を行う。
2. そこで得られた知見を用いて、より適切な分化状態でエダラボン、またsecretomeの効果を調べる。

Causes of Carryover

前年度に計画したように、RSMG-1細胞の性状解析を行ったために、当初の計画からは若干の予算の消化に違いが出ている。
しかし、現在の解析は順調に進んでおり、研究成果としてまとめるための費用で使用していく予定である。