2022 Fiscal Year Annual Research Report
Study of effects of radical scavenger edaravone and adipose stem cell exosome on X-Ray induced salivary gland damages
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18K09824
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
那須 優則 日本歯科大学, 生命歯学部, 教授 (50130688)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
堀江 哲郎 日本歯科大学, 生命歯学部, 講師 (10508675)
三橋 扶佐子 日本歯科大学, 生命歯学部, 助教 (60187896)
井出 吉昭 日本歯科大学, 生命歯学部, 准教授 (70409225)
小林 朋子 日本歯科大学, 生命歯学部, 講師 (10548283)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | edaravone / HUVEC / X線 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
我々はヒト臍帯静脈血管内皮細胞（HUVEC）およびラット顎下腺由来細胞株(RSMG-1)のX線照射障害に対するedaravoneの軽減効果を細胞増殖能で評価した。
HUVECについて先行して実験を行った。 まず細胞をプレートに播種、1日後にX線（0 - 5Gy）を照射し、その後、5日間の増殖曲線を作製した。その結果、0、1、2、5Gyの順で細胞増殖率が低くなり、線量依存的に細胞増殖が抑制されることが明らかとなった。Edaravoneには添加濃度により、細胞毒性を示すことが報告されていることから、次の実験を行った。HUVECを24ウェルプレートに播種し、播種1日後、edaravoneを添加した培地（0、0.01、0.1、1、10、20mM）に交換し10分間培養した。その後に通常培地に交換し、5日間にわたり増殖曲線を作製した。その結果、0.1、0.01mMでは正常に増殖したが、1-20mMでは細胞増殖が抑制された。Edaravoneの濃度は0.1 mMが適当であると考えられた。そこで、HUVECを24ウェルプレートに播種し、その1日後にedaravoneを0.1mM添加した後、X線（0、1、2、5 Gy）を照射した。10分後に通常培地に戻し、5日間の増殖曲線を作製した。その結果、5Gy照射群において、X線照射による細胞増殖率の抑制がedaravone添加により軽減された。また、活性酸素種を検出する試薬であるCellROXを用いてX線を照射した細胞から、発生する活性酸素を測定した結果、edaravoneの添加により有意に発生が抑えられていることを明らかとした。これらの結果は日本歯科大学紀要第52巻に報告した。
RSMG-1についてもedaravoneの有効濃度について検討を進めているところである。
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