2018 Fiscal Year Research-status Report
胆汁鬱滞による脂質代謝異常に対する小腸の役割の解明
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18K11006
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| Research Institution | Kindai University |
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Principal Investigator |
田中 裕滋 近畿大学, 医学部附属病院, 講師 (00465650)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上硲 俊法 近畿大学, 医学部附属病院, 教授 (20233934)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | TICE / 胆汁鬱滞 / 脂質代謝異常 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
コレステロール排泄機構として胆管を介して腸管へ排泄される経路が唯一の経路と考えられてきたが、新しく血管内コレステロールが、直接、小腸上皮細胞を介して腸管へ排泄する機構(TICE)が発見された。2018年度は胆汁鬱滞モデルが引き起こす脂質代謝異常とTICEとの関係、およびその際のTICEを担う分子機構の解明を目的とした。また、胆管ルート以外の排泄経路としてTICE以外に腎臓を介した尿中へのコレステロール排泄の有無、およびその分子機構についても検討した。肝内胆汁うっ滞を誘発するモデルとして、ANIT(α-Naphthylisothiocyanate)75mg/Kgをマウスに単回経口投与し、投与72時間後の血液、肝、糞と投与48時間後から72時間後の蓄尿中のコレステロール値と尿細管上皮細胞、および小腸上皮細胞のトランスポーターやレセプターの発現について解析した。コントロール群に比較してANIT投与群では、血中のビリルビン、胆汁酸、ALP、および総コレステロールの上昇と肝内の総コレステロールおよび胆汁酸の増加が認められたことより、ANIT投与により胆汁鬱滞と高コレステロール血症が誘導されることが確認された。また、ANIT群では糞中と尿中の総コレステロールの上昇が認められ、肝内胆汁鬱滞下では胆汁中へのコレステロール排泄が低下することより、糞中コレステロール増加の要因としてTICEを介した増加が示唆された。さらには胆汁鬱滞下でTICE以外に尿中へコレステロールが排泄されることが明らかとなった。遺伝子発現に関しては、ANIT群の空腸上皮細胞で血管側のLDLレセプターとSrb1の増加が認められ、これらのレセプターがTICEに関与している可能性が示唆された。また、尿細管上皮細胞の血管側のSrb1と管腔側のAbcg8の増加傾向が認められ、尿中コレステロール排泄に関与している可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初の計画通り、胆汁鬱滞誘発モデルの1つであるANIT(α-Naphthylisothiocyanate)をマウスに経口投与することで肝内胆汁鬱滞を誘発し、投与72時間後の糞におけるコレステロールを測定したところ、糞中の総コレステロールの増加を認めた。加えて、胆管ルート以外の他の排泄経路として、尿中総コレステロールを測定したところ、ANIT投与群で増加を認めた。また、TICEを担う分子機構に関して、空腸上皮細胞のコレステロール関連遺伝子の発現を解析したところ、血管から上皮細胞内へのコレステロール取り込みを担うLDLレセプターとSrb1の発現の増加を認めたことより、少なくとも、薬剤誘発性肝内胆汁鬱滞モデルにおけるTICEの増加とその担当分子が推察できた。これらの知見に関して、米国毒性学会で発表を行った。また、並行して総胆管結紮モデルを用いた研究が現在進行中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
2019年度は、薬剤誘発性肝内胆汁鬱滞モデルだけでなく、他のモデルとしてラットの総胆管結紮モデルを用いる予定である。総胆管を結紮することで完全に胆管ルートからのコレステロール排泄を遮断し、純粋に小腸や腎臓から糞便や尿へとコレステロールが排泄されるかどうか確認し、その際のTICEや腎臓を介したコレステロール排泄の担当分子機構に関して小腸上皮細胞と腎尿細管上皮細胞のコレステロール関連遺伝子の発現の変化を検討する予定である。また、ラットを用いることでマウスとの種差があるかどうかも確認する予定である。
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Research Products
(2 results)
