2020 Fiscal Year Research-status Report
糖尿病における炎症と異所性脂肪蓄積に関与する好中球とマイクロパーティクルの作用
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18K11078
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| Research Institution | University of Miyazaki |
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Principal Investigator |
服部 秀美 宮崎大学, 農学部, 准教授 (80508549)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 脂肪細胞 / マイクロパーティクル / 好中球 / 耐糖能異常 / 非肥満 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
脂肪組織由来間質細胞（ASCs:脂肪前駆細胞を含むヘテロな細胞群）あるいは脂肪細胞と好中球（Gr-1陽性細胞）との相互作用をin vitroで検討した。まず、マウスの皮下脂肪組織からASCsを採取し大量培養を行った。ASCsを脂肪細胞分化誘導で脂肪細胞に分化させた。マウスの腹腔にカゼインナトリウムを注入し24時間後、腹腔内に浸潤する細胞を採取しGr-1陽性細胞をMACSにより単離した。ASCsと好中球、及び脂肪細胞と好中球の共培養を行った。24時間後、培養上清を採取し、サイトカイン・ケモカイン、マイクロパーティクル量を測定した。ASCsとの共培養は、ASCsの継代数が少ないほどTNFaなどの炎症性サイトカイン分泌量が高くなり、マイクロパーティクルの発現量も多くなった。脂肪細胞との共培養の場合、未分化の細胞が多いほど炎症性サイトカインの分泌量が高くなった。ただ、炎症性サイトカインの濃度が高い場合は、IL-13などの抗炎症性サイトカインの分泌量も高くなっていた。
さらに、果糖ぶどう糖液糖水を過剰摂取させた非肥満耐糖能異常モデルマウスを作製した。膵臓のglucokinase、ketohexokinase、glucose transporter 2のmRNAの発現が著しく低下しており、それによりインスリン分泌不全が生じていることが示唆された。また、膵臓のamylaseのmRNAの発現も著しく低下していたことから、膵臓機能の低下が起こっていると考えられた。加えて、HE染色により異所性脂肪蓄積を調べたが確認できなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
細胞の共培養で出現するマイクロパーティクルをフローサイトメーターで分析できる十分量を採取することができなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
マイクロパーティクルがフローサイトメーターで分析できるよう培養スケールを大きくする。In vivoにおける異所性脂肪蓄積においては、大腿部にグリセロールを注入することにより解析を試みる。さらにマウスの週令の変更も検討する。
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| Causes of Carryover |
フローサイトメーターによる解析を十分に行うことができなかった。次年度、抗体の購入に充てる。さらに学会発表のための旅費を使用しなかったため、英語論文掲載料の経費に充てる。
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