犬悪性リンパ腫の免疫チェックポイント分子発現に関する基礎的研究

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K14578
• Research Institution: Obihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine
• Principal Investigator: 田川 道人 帯広畜産大学, 畜産学部, 助教 (00749468)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: 犬 / リンパ腫 / 免疫チェックポイント / PD-1 / PD-L1

Outline of Annual Research Achievements

免疫チェックポイントであるPD-1/PD-L1の阻害抗体により免疫抑制の解除が可能かどうかを評価するため、PBMCを用いて抗体存在下での培養実験を行った。健常犬3頭より3ml採血を行い、比重遠心法にてPBMCを採取した。PBMC 1x10^5cell/wellに抗PD-1抗体および抗PD-L1抗体を添加し96時間培養を行ったところ、有意な差はみられなものの抗体存在下では細胞増殖率が増加していた。
次に、リンパ腫罹患犬2頭より得られた腫瘍細胞とPBMCを混合し同様に抗体存在下で培養を行った。腫瘍細胞は腫大したリンパ節よりFNAにて採取し、洗浄後1x10^4cell/wellとし、同一症例のPBMCは1x10^5cell/wellに調整し混合培養を行ったところ、やはり抗体存在下では細胞増殖率が増加する傾向が得られた。
培養上清については、今後ELISAによりサイトカイン測定を行い、免疫状態について更なる検討を行う予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

コロナウイルスにより試薬の配達遅延や新規患者の受け入れ停止などが発生しており、実験を継続できる状況にない。

Strategy for Future Research Activity

すでに手元にある試薬類とデータで残りの解析を行う。新たな試薬や臨床検体が必要となる可能性があるが、その場合は現在のコロナウイルスによる影響がいつ収まるか次第である。

Causes of Carryover

学会の中止や試薬の配送遅延のため残金が発生した。
次年度で実験に必要な試薬類の購入を行う。