2018 Fiscal Year Research-status Report
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18K14710
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| Research Institution | Chiba University |
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Principal Investigator |
石田 研太郎 千葉大学, 大学院医学研究院, 助教 (20707898)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 頬ひげ / Ｍerkel細胞 / 三叉神経 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
平成30年度の研究は、研究実施計画を一部修正しつつ実施し、以下の成果を得た。
頬ひげのMerkel細胞の分化における上皮-神経相互作用の関与を解析するために、頬ひげ形成前のマウス胎仔の頬の皮膚と三叉神経節を用いた独自の器官共培養技術を開発し、その成果を論文にまとめて出版した（Ishida et al., Development, Growth & Differentiation 60(5), 291-299, 2018）。この技術を用いて頬ひげのMerkel細胞の分化における上皮-神経相互作用の関与を解析したところ、三叉神経節由来の神経線維との相互作用が無くとも、培養によって形成した頬ひげ原基の特定の部位でのMerkel細胞の分化が観察された。このことから、頬ひげにおけるMerkel細胞の分化において、三叉神経からのシグナルは必ずしも必須ではないことが示唆された。一方、正常発生の頬ひげ原基と比較して器官培養した頬ひげ原基では、分化するMerkel細胞の数が減少している傾向が観察された。この現象が、三叉神経との相互作用の欠如によるものか、培養条件の制限によるものかを検証する必要がある。また、出現する位置に関しては正常発生と概ね同等であった。このことは、Merkel細胞が分化する位置は、頬ひげ原基の発生過程において、何らかのメカニズムで自律的に決定していることを示唆していると考えられた。
Merkel細胞の蛍光追跡のための実験手法として計画していたマウス初期胚へのin vivoエレクトロポレーション法を習得した。文献に従い、蛍光タンパク質発現プラスミドベクターをマウス初期胚に注入して電気パルスを当てることにより、高効率で局所的な蛍光タンパク質の強制発現が観察された。この手法を頬の皮膚への遺伝子導入に応用することにより、Merkel細胞のレポーターマウスの作製を試みる予定である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
頬ひげのMerkel細胞の分化における上皮-神経相互作用の関与を解析に応用する、頬の皮膚と三叉神経節を用いた独自の器官共培養技術を開発し、論文にまとめて出版した。一方、Merkel細胞の蛍光追跡に関しては、基本となる技術を習得したもののMerkel細胞へ応用するまでには至らなかった。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後計画しているMerkel細胞で特異的に発現する遺伝子の同定に関しては、Merkel細胞の蛍光追跡が困難である場合に備えた対策を検討する。具体的には、Merkel細胞が分化する位置は頬ひげ原基の特定の部位に限局しているため、この部位を直接摘出して解析する。
また、Merkel細胞の分化のメカニズムの解析に関しては、独自の器官共培養技術の開発が済んでいることため、上記の遺伝子の同定を行えば問題なく着手可能である。
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| Causes of Carryover |
研究室の共通物品を使用することにより、今年度は物品費（器具・試薬・実験動物等）を節約できた。差額は次年度の物品購入費用に充て、研究の推進を図る。また、最終年度である次年度は学会発表と論文投稿を行う予定であり、本年度生じた差額をこれらの費用に充てる。
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Research Products
(3 results)
