2019 Fiscal Year Annual Research Report
Novel Treg expansion method based on TNFR2-selective receptor clustering.
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18K14877
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| Research Institution | Kobe Gakuin University |
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Principal Investigator |
井上 雅己 神戸学院大学, 薬学部, 助手 (80757097)
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2018-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 制御性T細胞 / イムノサイトカイン / TNFR2 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は、TNFR2シグナルを選択的かつ強力に活性化する分子として、「TNFR2アゴニストタンパク質」と「TNFR2に対する一本鎖抗体（scFv）」を融合した機能性イムノサイトカイン（TNFR2-ICK）を創製し、TNFR2シグナリング／クラスタリング作用に基づく制御性T細胞（Treg）選択的な新規増幅法の開発を目指すものである。Tregは免疫抑制機能に特化したリンパ球である。末梢Tregの量的増加により、自己免疫疾患や臓器移植の拒絶反応、移植片対宿主病（GvHD）の抑制を図る治療法が期待されている。昨年度は、哺乳類細胞タンパク質発現系を用いて、TNFR2-ICKを作製した。本年度は、TNFR2-ICKの特性解析・機能解析を行い、下記の成果を得た。
（1）in vitroにおけるTNFR2-ICKの機能： BIAcoreを用いてTNF受容体に対する結合力を調べた結果、TNFR2-ICKはTNFR2に選択的に結合することが分かった。また、TNFR2発現細胞を用いて生物活性を調べた結果、TNFR2-ICKは、TNFR2アゴニストやTNFR2-scFvに比べて低濃度でシグナルを伝えることが分かった。従って、イムノサイトカイン構造は、シグナル伝達活性を向上させ、効率よくTNFR2シグナルを誘導できることが判明した。
（2）ex vivoにおけるTreg増幅効率： ヒト末梢血単核球（PBMC）にTNFR2-ICKを加えて培養し、細胞増殖を調べた結果、Tregが選択的に増幅することが分かった。TNFR2-ICKは、TNFR2アゴニストに比べて効果的にTregの増幅を誘導できることが確認できた。
（3）in vivoにおけるTreg増幅効果： 免疫不全マウスにPBMCを移入したGvHDモデルマウスに対するTNFR2-ICKの効果を検証している。
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