2018 Fiscal Year Research-status Report
虚血組織傷害後の炎症収束と組織修復におけるマクロファージと制御性T細胞の機能解明
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18K15129
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| Research Institution | Keio University |
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Principal Investigator |
駒井 恭子 慶應義塾大学, 医学部(信濃町), 特任助教 (80574590)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2022-03-31
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| Keywords | 炎症 / 組織修復 / 制御性T細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
本研究は心臓における炎症亜急性期の組織修復性マクロファージおよび慢性期に浸潤するTregの分化誘導機構を明らかにし、炎症の終息と組織修復の機序を心筋梗塞をモデルに解明するものであった。組織傷害による炎症のスキームは大枠が理解されてきたが炎症の終息と組織修復のメカニズムの解明は今後の課題である。本研究によって炎症性から修復性マクロファージへの転換機構が解明されれば世界的に初めての成果となり、また、Tregの組織修復機能を解明することで、心筋梗塞に限らず、新たな炎症の制御法の開発が期待できる点で画期的であると考え、大きく分けて以下の二点について研究に着手した。実際には心筋虚血モデルではその個体差が大きく、結果の解析が困難なことが多かったため、同時に大動脈結紮による心筋圧負荷モデルにも取り組んでおり、現在は圧負荷モデルを中心に解析を行っている。
(1)亜急性期に修復性マクロファージを誘導する因子および転写因子を明らかにする。
MHC classⅡを発現するCD11ｂ陽性細胞は大動脈結紮後７日をピークに増加し、その後減少していることが分かった。
(2) 亜急性期～慢性期の肥大心筋における炎症細胞の動態を把握する。
①亜急性期～慢性期の肥大心筋における T 細胞、特に Treg の心不全心筋組織への影響を明らかにする。心筋圧負荷モデルでは大動脈結紮後４週から６週にかけてCD4陽性T細胞は増加しており、T細胞を欠如するCD3欠損マウスでは心筋肥大が増悪することが分かった。② ①での影響が CD4陽性T細胞のうち何によるものなのかを解析するためT細胞欠損マウスに各T細胞分画を移入したモデル、およびTreg欠損マウス（DREGマウス）心筋圧負荷モデルの解析中である。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
心筋虚血モデルでは個体差が大きく、結果の解析が困難なことが多く、同時に大動脈結紮による心筋圧負荷モデルにも取り組んだため、進捗に遅れが出ている。
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| Strategy for Future Research Activity |
MHC classⅡを発現するCD11ｂ陽性細胞は大動脈結紮後７日をピークに減少し、classⅡ陰性CD11ｂ細胞が増加する要因を究明する。
T細胞のうちどの分画が病態に重要であるかを特定する。特にTregの心筋組織への影響を明らかにできた場合、梗塞巣でのTregの増殖と集積の機序を明らかにする。まず樹状細胞が心筋梗塞部位においてTregを増幅しやすい寛容誘導性樹状細胞に転換する可能性を検討する。骨髄由来樹状細胞と梗塞部位の抽出液存在下でTregを培養し、Tregが増幅する系を確立する。これに対して既知のTregを増加させる機構 (IL-2、IL-33やTGFβ、あるいはレチノイン酸、プロスタグランジン(PGE2)など)の中和抗体やアンタゴニストを検討する。候補物質がわかればその欠損マウスや中和抗体を用いてそれらのTreg増加における意義を明らかにする。もし既知のものでない場合は梗塞部位の抽出液を分画し、試験管内でTregを増加させる候補物質を絞り込む。さらにそれらの産生細胞を免疫染色やセルソーターを用いて明らかにする。
Treg 由来の心筋細胞再生因子を同定する。骨格筋の場合、Treg は Amphiregulin (Areg)を介して筋肉前駆細胞から筋細胞への分化を誘導し組織修復に寄与することが報告されている (Burzyn et al. Cell. 2013). 本研究でも Treg 特異的Areg マウス等を用いて Treg が心筋再生に及ぼす影響を明らかにする。またそれ以外の因子を同定するために Tregと心筋前駆細胞の共培養系を確立する。
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| Causes of Carryover |
心筋虚血モデルではその個体差が大きく、結果の解析が困難なことが多く、同時に大動脈結紮による心筋圧負荷モデルにも取り組み、進捗がやや遅れているため次年度使用額が生じた。
モデル変更に伴い、マイクロアレイ解析に一部使用するほか、物品費として使用を計画している。
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Research Products
(1 results)
