単純ヘルペスウイルスのNK細胞回避機構の解明

2019 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K15164
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 小柳 直人 東京大学, 医科学研究所, 助教 (90738121)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: HSV / NK細胞

Outline of Annual Research Achievements

単純ヘルペスウイルス(HSV: herpes simplex virus)は、ヒトに多様な病態を引き起こす医学的に非常に重要なウイルスである。宿主に感染したHSVは終生潜伏感染し、宿主が内的・外的刺激を受けた際に再活性化し、回帰発症する。HSVによる回帰発症が何度も繰り返される原因の一つとして、HSVが多様な宿主免疫回避機構を獲得していることが考えられる。本研究は、特に、NK細胞からの傷害回避を司るHSV因子を同定し、その制御機構を解明することを目的としている。
本年度は、同定した候補HSV因子について各変異組換えHSVを作出し、それらの感染細胞におけるNK細胞障害回避能を評価した。野生体もしくは変異組換えHSVを培養細胞に感染させ、それらとNK細胞を共培養し、各感染細胞のNK細胞による障害感受性を評価した。その結果、感染細胞においてNK細胞による障害回避に寄与するHSV因子の候補の存在が示唆された。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

一過的発現系によるスクリーニングによって、NK細胞の活性化に寄与するリガンドの細胞表面発現抑制に寄与するHSV因子を網羅的に同定した。それらについて、各変異組換えHSVを作出し、候補HSV因子が感染細胞においてNK細胞活性化リガンドの細胞表面発現抑制に寄与するか解析した。その結果、NK細胞活性化リガンドの細胞表面発現抑制に寄与する複数の候補HSV因子が示唆された。また、本候補HSV因子に変異を導入した組換えHSV感染細胞は野生体HSV感染細胞に比べてNK細胞による障害を受けやすいことが示唆された。

Strategy for Future Research Activity

これまでに同定した、NK細胞による障害回避に寄与するHSV候補因子について、その障害回避のメカニズムはNK細胞活性化リガンドの細胞表面量抑制であることが示唆される。本年度はHSV因子による細胞表面抑制機構を解明することおよび生体レベルでの意義を解析する。

Causes of Carryover

今年度はこれまでに同定したNK細胞活性化リガンドの細胞表面量を抑制する複数の候補HSV因子のうち、上位のHSV因子を中心に解析を実施してきた。しかし、単独のHSV因子ではNK細胞活性化リガンドの細胞表面抑制効果は限定的であった。本研究の目的はHSV因子によるNK細胞回避機構の全体像を明らかにすることであり、その目的達成に必要なため次年度使用額が生じた。使用計画としては、複数の候補HSV因子に変異を導入した多重変異組換えHSVを作出し、これまでの実験系を基に解析を進める。