2019 Fiscal Year Annual Research Report
Molecular mechanisms of neurocircuit in motor neuron diseases
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18K15361
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
飯田 円 名古屋大学, 医学系研究科, 学振特別研究員(RPD) (40815437)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 球脊髄性筋萎縮症 / SBMA / Srcシグナル異常 / Src阻害薬 / Cre-loxPシステム |
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| Outline of Annual Research Achievements |
A. SBMAモデルマウスにおける化合物Xの効果
我々はSBMAマウスモデルを用いて網羅的シグナル解析を行い、SBMAの病態においてSrcのリン酸化上昇が重要であることを見出した。そこで昨年度は新規Src阻害薬である化合物Xの効果をSBMAマウスモデルを用いて明らかにした。またSBMAにおいてSrcのリン酸化が上昇する機序としてARとSrcの直接的な結合が重要であることを示した。今年度はSBMA患者における患者剖検組織（脊髄・骨格筋）を用いて免疫組織化学の手法によりSrcシグナルの変化を検証した。SBMA患者の運動ニューロンと骨格筋においてコントロールと比較してリン酸化Srcの上昇をみとめた。またSBMA患者の骨格筋生検組織においてもSrcの活性化が明らかとなり、SBMAの発症初期からSrcシグナルが活性化していると考えられた。さらにSBMA患者より樹立したiPS細胞由来運動ニューロンおよび変異ARを一過性強制発現させたヒト骨格筋細胞におけるSrcリン酸化の評価を行った。これらはいずれもコントロールと比較してSBMAモデルでSrcリン酸化の上昇をみとめ、SBMAマウスモデルより得た知見と同様であった。
B. 運動ニューロン-後根神経節ネットワーク変性の解析
CAGリピートが97個に延長したヒトARをloxP配列で挟み、C末端にNanolucルシフェラーゼ配列をもつ全長約4.5kbpの人工遺伝子を合成し、マウス受精卵へのインジェクションを行った。
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