2019 Fiscal Year Annual Research Report
Development of novel therapies targeting the dynamics of tumor microenvironment and HIF-1
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18K15589
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
小林 稔 京都大学, 生命科学研究科, 特定助教 (40644894)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 低酸素 / 腫瘍内微小環境 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
昨年度、HIF-1依存的に部位特異的組換えタンパク質Cre-ERT2を発現する遺伝子5HREp-Cre-ERT2を、遺伝子改変マウス作出の際に導遺伝子を安全に挿入可能なセーフハーバー遺伝子座と考えられ、この領域に導入された遺伝子はほぼ全ての組織で発現することが知られているROSA26遺伝子座にknock-inしたマウスを樹立していた。しかしながら、本マウスや本マウスから樹立した細胞において、低酸素刺激によるCre-ERT2の発現上昇を確認できなかったことから、別のセーフハーバー遺伝子座として知られるTIGRE領域に、まずHIF-１依存的に発光タンパク質luciferaseを発現する遺伝子5HREp-Lucを導入したマウスを作成した。そして当該マウスから樹立した細胞を用いて検討した結果、低酸素刺激によるluciferase活性の上昇が確認できた。この結果から、TIGRE遺伝子座が低酸素依存的な人工遺伝子の導入に適していることが期待される。そこで、現在TIGRE遺伝子座に5HREp-Cre-ERT2を導入したマウスを作成中である。
今後、作出したマウスのHIF-1活性、タモキシフェン依存的なCre-ERT２の発現誘導確認を行った後、当該マウスをCre活性依存的に光標識が入るマウスと自然発がんマウスモデルなどとかけ合わせることで、HIF-1が活性化したがん細胞が、どのようなタイムコースで悪性固形腫瘍内を移動するかを時空間的に解析していく。同時に、HIF-1活性化因子の阻害などによってHIF-1が活性化したがん細胞が悪性固形腫瘍内を移動するタイムコースがどのように変化するかなども併せて解析していく予定である。
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