抗原特異的T細胞受容体を用いた肝癌治療に関する検討

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K15778
• Research Institution: Kanazawa University
• Principal Investigator: 玉井 利克 金沢大学, 医学系, 助教 (40782082)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: ペプチド / 肝癌関連抗原 / T細胞受容体 / 肝細胞癌

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、肝癌関連抗原に特異的なTCRを同定し取得し、その中から肝癌治療に有効と考えられるTCRを選択し、ヒト肝癌治療へ応用していくための基礎データを取得することである。本研究で、HLA-A24およびHLA-A2拘束性の肝癌関連抗原特異的TCRを数多く取得することで、今後の我が国での肝癌治療に寄与することができると考える。本研究は次の3段階のステップで行う。3段階の実験は、1)ペプチド特異的CTLのTCRのクローニングと機能解析、2)肝細胞株に対する細胞傷害活性を証明するin vitro実験モデルの構築、3)in vivo TCR遺伝子治療モデルの構築とこれを用いたTCRの機能評価、からなる。
本年度は、2018年度に同定したＨLA-Ａ24拘束性のMRP3由来ペプチドとhTERT由来ペプチドに特異的なTCRを、臨床応用につなげるために、内在性のTCR発現を抑制するしsiRNAのvector(Cancer Res 2009;69:(23))に組み込んで、細胞株に対する細胞傷害活性を見る予定であった。取得したTCR遺伝子をsiRNA vectorに組み込むにあたり、vectorのtempleteやTCR遺伝子をPCRで増幅する手技や、増幅断片を結合させる手技で想定外に難渋したが、siRNA vectorに組み込むことはできた。しかし、本年度中に細胞傷害活性をみるには至らなかったため延長申請をした。次年度は、siRNA vectorに組み込んだTCRを用いて、共焦点レーザー顕微鏡で視覚的に細胞傷害活性を検討する予定である。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

交付申請書に記載した「研究計画」のタイムラインからはやや逸れており、当初の計画からみるとやや遅れている。

Strategy for Future Research Activity

肝細胞株に対する細胞傷害活性を証明するin vitro実験モデルの構築を目指し、また、HTLエピトープとの併用効果に関する基礎的検討も進めていく予定である。

Causes of Carryover

取得したTCR遺伝子をvectorに組み込むにのに想定以上に時間を要したため、当初のタイムラインより遅れ、本年度中に予定していた額より経費が少なくなり次年度使用額が生じた。次年度は細胞傷害活性の検討を中心に研究を進める。