2019 Fiscal Year Research-status Report
肝細胞癌の病態形成における抑制系免疫細胞とnon-coding RNAの関わり
Project/Area Number |
18K15802
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Research Institution | Tohoku University |
Principal Investigator |
岩田 朋晃 東北大学, 大学病院, 医員 (30803647)
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Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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Keywords | 肝細胞癌 / 腫瘍免疫 / SNHG8 / MDSC / TAM |
Outline of Annual Research Achievements |
肝細胞癌の再発や転移のリスクや予後を評価する上で、「癌細胞側の因子」 と「腫瘍免疫側の因子」を検討する必要がある。「癌細胞側の因子」としてnon- coding RNA (microRNA や long non-coding RNA)の重要性が示されてきており、一方で「腫瘍免疫側の因子」として、単球・マクロファージや骨髄球系細胞と いった抑制系免疫細胞の重要性が示されてきている。しかしながら、「癌細胞側の因子」と「腫瘍免疫側の因子」との関連については不明な点が;多い。本検討では肝細胞癌のnon-coding RNAに着目し、腫瘍免疫動態にどのような影響を及ぼすかを明らかにすることを目的としている。 https://portal.gdc.cancer.gov/のデータを用いて、ヒト肝細胞癌のnon-coding RNAの発現を調べた。long non-coding RNAであるSNHG6、SNHG8、SNHG5がヒト肝細胞癌において高発現していることを見出した。SNHG8のプライマーを作成し、代表的な肝細胞癌株(HepG2、Hep3B、Huh7S、Li7)での発現を確認した。 最近の研究ではSNHG8は肝細胞癌において、miR149-5pを介することでHCCの再発に関連する可能性があることが示された。本検討では今後、siRNAにより発現を抑制した肝細胞癌株を作成し、肝細胞癌株の増殖能や遊走能を検証すると同時に、末梢血リンパ球と共培養することで、SNHG5/6/8を抑制した肝細胞癌株がリンパ球に対してどのような影響を及ぼすかを検証していく。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
https://portal.gdc.cancer.gov/のデータを用いて、ヒト肝細胞癌のnon-coding RNAの発現を調べ、次にhttp://www.cbioportal.org/のデータベースを用いて、 non-coding RNA発現の検証を行った。それによりヒト肝細胞癌において、long non-coding RNAであるSNHG5、6、8が高発現していることを見出した。これらの long non-coding RNAについては、肝細胞癌での研究はほとんどされておらず、今後の研究が必要な分野であると考えられる。 続いて、SNHG5/6/8のプライマーを作成し、代表的な肝細胞癌株(HepG2、Hep3B、Huh7S、Li7)を用いてreal-time PCRを施行した。これら肝細胞癌株において SNHG5/6/8の発現を確認した。また、SNHG8の発現は、高い順にHepG2、Li7、Huh7S、Hep3Bであった。
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Strategy for Future Research Activity |
SNHG5, 6, 8のprimerを作成し、各種肝癌細胞株における発現を確認した。また、siRNAを用い、各種肝癌細胞株において、同遺伝子を抑制した株を作成することができた。 現在、同抑制株と末梢血リンパ球とを共培養し、フローサイトメトリーを行うことで、抑制系免疫細胞であるMDSCやTAMの誘導が変化すること可能性を見出している。 上記を反復した後は、抑制系免疫細胞に影響を及ぼした因子を特定する予定である。
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Causes of Carryover |
フローサイトメトリーに使用する抗体使用した金額が、計上していた金額より少なくすんだためと思われる。
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