Elucidation of gastric carcinogenesis mechanism focusing on suppression of oncostatin M signal

2022 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18K15806
• Research Institution: University of Toyama
• Principal Investigator: 南條 宗八 富山大学, 学術研究部医学系, 助教 (70649285)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2023-03-31
• Keywords: 胃がん / DNAメチル化 / OSMR

Outline of Annual Research Achievements

ヒトのH.pylori非感染胃粘膜5検体、胃がん患者の胃がん組織および(H.pylori感染)非がん胃粘膜16対の検体でOSMR遺伝子 のmRNA発現レベル、DNAメチル化レベルを解析した。胃がん組織は胃がん患者の非がん胃粘膜や非感染胃粘膜よりもOSMR遺伝子のmRNA発現レベルが高かった。ま た、胃がん患者の非がん胃粘膜は非感染胃粘膜や胃がん組織よりDNAメチル化レベルが高かった。さらに、OSMR遺伝子プロモーター領域のDNAメチル化レベルと同 遺伝子のmRNA発現レベルは逆相関関係にあった。H.pylori非感染胃粘膜は全て、低DNAメチル化状態でmRNA発現も低レベルであった。胃がん患者の非がん胃粘膜 では低DNAメチル化状態から高メチル化状態まで分布していたが、mRNAレベルは総じて低かった。胃がん組織ではほとんどの検体で低DNAメチル化状態で一部の検 体でmRNA高発現となっていた。OSMR高発現の胃がん組織はいずれもびまん型の組織型であった。 ラット正常胃上皮細胞RGEにTNFα、オンコスタチンM(以下、OSM)刺激を加え、細胞増殖の変化を確認した。TNFα(25ng/ml)またはOSM(10ng/ml)単独の刺激 では細胞増殖速度は上昇した。一方、TNFα、OSMの共刺激では、それぞれの単独刺激に比べて細胞増殖速度が低下した。特に、day5-7にかけて細胞数の低下した。TNFα、OSM濃度を変えても(TNFα 12.5ng/ml、OSM 5ng/ml)同様の結果であった。ラット正常胃上皮細胞RGEにおいてOSMRのノックダウン実験を行うためにsiRNAを３種類作成し、それぞれ10nM、30nM、100nMの濃度で作用させてRT-PCRにてOSMRの発現量を測定した。結果として、３種類のsiRNAともにOSMRの発現を低下させることができなかった。