2020 Fiscal Year Annual Research Report
Constructing in vitro non-alcoholic steatohepatitis model using human cultured hepatocyte
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18K15814
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
村上 英介 広島大学, 病院(医), 助教 (30813175)
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2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 非アルコール性脂肪肝炎 / 肝星細胞 / TM6SF2 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
近年、肥満や生活習慣病の増加と共に、脂肪肝を表現型とする非アルコール性脂肪性肝疾患が世界的に増加傾向を示しているが、そのうち、非アルコール性脂肪肝炎（以下NASH）は肝細胞内の脂肪蓄積と共に、単核球浸潤による壊死性炎症反応、肝星細胞活性化による膠原線維を主体とする線維化を生じ、慢性進行性肝疾患と考えられている。NASHには遺伝因子を含めた多因子が複雑に相互作用することが推定され、その発症と病態の進展に関連する正確な機序はいまだ不明である。本研究は、肝細胞、肝星細胞、単核球の相互作用におよぼす影響を、これら3系統の細胞；初代培養ヒト肝細胞(Primary Hepatocyte)、培養不死化肝星細胞株(LX-2)、培養単球株(THP-1)を用いて、より生体内環境に近い共培養系を構築し、肝細胞と周辺細胞間における細胞間相互作用の検証を行う事を目的とする。培養系細胞を用いた解析では、NASHにおける高飽和脂肪酸環境の再現のためミセル化パルミチン酸(16:0)と、大腸菌由来リポポリサッカライドを、肝細胞と肝星細胞の共培養下で添加し、相乗的・濃度依存的に、再現性を有して星細胞を活性化し、肝細胞の脂肪的増加を確認した。より生体内に近い条件に変更するため、活性化単核球の培養上清と肝細胞、肝星細胞を共培養する系で検証した。活性化単核球上清内には、IL-1をはじめとする炎症性サイトカインの上昇が認められ、共培養でミセル化パルミチン酸との相乗的・濃度依存的に、再現性を有して星細胞活性化が確認された。さらに、NASHに関連する遺伝因子のうち、TM6SF2遺伝子多型に着目し、TM6SF2遺伝子のノックダウンした肝細胞、肝星細胞を、活性化単核球と共培養する系で検証した。その結果、肝細胞脂肪合成上昇および星細胞活性化が同時進行で確認される結果が得られ、ヒトNASHの微小環境に類似した状態と考察した。
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Research Products
(5 results)
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[Journal Article] In vitro analysis of hepatic stellate cell activation influenced by transmembrane 6 superfamily 2 polymorphism2021
Author(s)
Liu S, Murakami E, Nakahara T, Ohya K, Teraoka Y, Makokha GN, Uchida T, Morio K, Fujino H, Ono A, Yamauchi M, Kawaoka T, Miki D, Tsuge M, Hiramatsu A, Abe-Chayama H, Hayes NC, Imamura M, Aikata H, Chayama K.
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Journal Title
Molecular Medicine Reports
Volume: 23
Pages: 1-7
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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[Journal Article] Risk factors for histological progression of non-alcoholic steatohepatitis analyzed from repeated biopsy cases2020
Author(s)
Daijo K, Nakahara T, Inagaki Y, Nanba M, Nishida Y, Uchikawa S, Kodama K, Oya K, Morio K, Fujino H, Ono A, Murakami E, Yamauchi M, Kawaoka T, Miki D, Tsuge M, Hiramatsu A, Hayes CN, Imamura M, Aikata H, Ochi H, Chayama K.
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Journal Title
Journal of gastroenterology and hepatology
Volume: 8
Pages: 1412-1419
DOI
Peer Reviewed / Open Access
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