抗酸化ストレス酵素APE1の慢性腎臓病における役割解明

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K15992
• Research Institution: Asahikawa Medical College
• Principal Investigator: 丸山 啓介 旭川医科大学, 大学病院, 医員 (30648324)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: APE1 / 抗酸化ストレス / 腎臓病

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的であるAPE1発現プラスミドベクターを用いた遺伝子治療による有効性を評価するために、（1）APE1発現およびEGFP発現プラスミドベクター（コントロールベクター）の作製、（2）プラスミドベクターの経腎静脈投与法の確立、これらの2点を行った。（1）に関しては当初ヒト臍帯静脈内皮細胞から抽出したRNAを鋳型として合成したcDNAを用いてクローニングを行う予定であったが、予定を変更しマウス大腸がん細胞株から抽出したRNAを用いてクローニングを行った。DNAシーケンスを行いマウスAPE1の配列を確認した。またAPE1はNF-κBの活性を増強することが知られており、ルシフェラーゼアッセイを用いプラスミドの機能を評価した。APE1発現プラスミドはコントロールであるEGFP発現プラスミドと比べ、NF-κB活性を増強することを確認した。（2）に関しては、実際にこれらのプラスミドを経腎静脈投与を行い、免疫染色を用いてAPE1およびEGFPの発現を確認した。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

APE1遺伝子のクローニングが順調に行えたため。

Strategy for Future Research Activity

腎障害モデルマウスにプラスミドベクターを投与し、治療効果を検討していく予定である。