シェーグレン症候群におけるNR4A2を標的とした新規治療戦略の構築

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K16137
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 高橋 広行 筑波大学, 附属病院, 病院講師 (10770745)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: シェーグレン症候群

Outline of Annual Research Achievements

【目的】シェーグレン症候群 (SS)様唾液腺炎を自然発症するT細胞特異的RORγtトランスジェニックマウス (RORγtTg)におけるRORγt antagonist (A213)の治療効果と、その作用メカニズムにおけるNr4a2の意義を明らかにする。
【方法】1)6週齢の雌RORγtTgに、A213あるいはPBSを3日に1回、2週間経口投与し、①唾液量、②唾液腺の病理学的所見、脾臓および頸部リンパ節 (CLN)のCD4+T細胞における、③CD25、Foxp3発現、④Nr4a2発現を2群間で比較した。2)in vitroで抗CD3、CD28抗体で刺激したRORγtTg脾臓CD4+T細胞にA213を添加し、①CD25発現、②Nr4a2発現への効果をフローサイトメトリーで解析した。
【結果】1)①投与前に対する投与終了時の唾液量の比は、A213投与群(3.1±1.4)では、PBS投与群 (1.3±0.3)と比較し有意に改善した。②投与終了時の唾液腺のfocus scoreは、PBS投与群 (2.0±0.6)と比較しA213投与群 (0.2±0.2)で有意に低値であった。③CLNのCD4+T細胞におけるCD25+細胞の割合はA213投与群で有意に低下したが、脾臓では2群間に有意差はなかった。また、CLNのCD4+CD25+Foxp3+細胞、CD4+CD25+Foxp3-細胞の割合は、PBS投与群と比較しA213投与群で有意に減少したが、脾臓では同等であった。④解析中である。2)RORγtTG由来脾臓CD4+T細胞では、A213により①濃度依存的にCD25発現が有意に低下した。②解析中である。
【結論】A213は、RORγtTgのCLNのCD4+CD25+細胞を減少させ、SS様唾液腺炎を抑制した。その作用メカニズムにおけるNr4a2の意義は解析中である。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

当研究室が開発したシェーグレン症候群のモデルマウスであるRORγtトランスジェニックマウスを有効に活用し、in vivoにおけるRORγt antagonistを用いた治療実験とその作用メカニズムにおけるNr4a2の意義について、解析を進めることができている。一方、当初予定していたimportazoleを用いた治療実験は、投与プロトコールの確立に難渋しており、遂行が困難であると思われる。

Strategy for Future Research Activity

当研究室が保有するシェーグレン症候群のモデルマウスを有効に活用しながらRORγt antagonistを用いた治療実験を進めていき、その作用メカニズムにおけるNr4a2の意義を明らかにすることで、in vivoにおけるNr4a2の病態への関与と治療標的としての可能性をさらに検討したいと考えている。

Research Products

• [Presentation] 唾液腺炎を自然発症するRORγtトランスジェニックマウスに対するRORγtアンタゴニストの効果と作用メカニズム (2019)
  • Author(s): 小野由湖、高橋広行、坪井洋人、森山雅文、工藤華枝、本田文香、安部沙織、近藤裕也、松本功、中村誠司、住田孝之
  • Organizer: 第63回日本リウマチ学会総会・学術集会
• [Presentation] 唾液腺炎を自然発症するRORγtトランスジェニックマウスに対するRORγtアンタゴニストの効果と作用メカニズム (2018)
  • Author(s): 小野由湖、高橋広行、坪井洋人、森山雅文、浅島弘充、工藤華枝、安部沙織、近藤裕也、松本功、中村誠司、住田孝之
  • Organizer: 第62回日本リウマチ学会総会・学術集会
• [Presentation] シェーグレン症候群患者のCD4陽性T細胞におけるNR4A2発現亢進とTh17分化 (2018)
  • Author(s): 高橋広行、坪井洋人、浅島弘充、近藤裕也、松本功、住田孝之
  • Organizer: 第62回日本リウマチ学会総会・学術集会
• [Presentation] A potential role of NR4A2 overexpression in CD4+ T cells in the pathogenesis of Sjogren’s syndrome. (2018)
  • Author(s): Takahashi H, Tsuboi H, Asashima H, Kudo H, Ono Y, Abe S, Kondo Y, Matsumoto I, Sumida T.
  • Organizer: The 14th International Symposium on Sjogren’s syndrome (Washington DC, USA)
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] RORγt antagonist suppressed spontaneous sialadenitis in RORγt transgenic mice via inhibition of IL-17 production with increase of regulatory T cells. (2018)
  • Author(s): Ono Y, Tsuboi H, Moriyama M, Asashima H, Kudo H, Takahashi H, Kondo Y, Matsumoto I, Nakamura S, Sumida T.
  • Organizer: The 14th International Symposium on Sjogren’s syndrome (Washington DC, USA)
  • Int'l Joint Research