2018 Fiscal Year Research-status Report
免疫チェックポイント阻害薬併用凍結療法の腫瘍免疫変調効果の検討
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18K16429
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| Research Institution | Teikyo University |
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Principal Investigator |
山内 良兼 帝京大学, 医学部, 助教 (30445390)
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2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | 腫瘍免疫 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト血液サンプルにおいて、Ficoll処理後のPBMCからCD11b+ HLA-DRlow/- CD14-CD15+細胞をPMN-MDSC、CD11b+ HLA-DRlow/- CD14+ CD15-細胞をM-MDSCとしてゲーティングする形で、MDSCの解析を行う方法を確立できた。NO産生能およびROS産生能を検出することによりMDSCの活性を評価できるようになった。CD4+ T細胞およびCD8+ T細胞を抽出した後、CD45RA+ CD62L+細胞をナイーブT細胞、CD45RA- CD62L+細胞をエフェクターT細胞、CD45RA+ CD62L-細胞をエフェクターメモリーT細胞、CD45RA- CD62L-細胞をセントラルメモリーT細胞、としてそれぞれゲーティングする形でT細胞機能解析を行う方法を確立できた。TNF-αおよびIFN-γについてそれぞれ細胞内染色を行うことによりMDSCの活性を評価できるようになった。まだ十分な数の評価は行えていないが、免疫チェックポイント阻害薬の影響によりMDSCとT細胞免疫の間での相互作用が遮断されている可能性が示唆されている。
さらにMDSCのPD-L1発現を安定的に確認できるようになってきており、PD-L1発現の有無が免疫チェックポイント阻害薬の効果判定に使用できるのかどうか臨床判断との間での相関性を評価できるようになる見込みである。
マウスモデルでの免疫機構を測定する方法としてCD11b+Ly6ClowLy6G+細胞をPMN-MDSC、CD11b+Ly6ChiLy6G-細胞をM-MDSCとしてゲーティングする形でMDSCの解析を行う方法をある程度確立できた。マウスにおいても同様に各T細胞分画をゲーティングする形でT細胞機能解析を行う方法を確立できた。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
マウス血液での安定的な免疫機能解析のためのフローサイトメトリー条件の確立に時間がかかり、少し遅れている
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| Strategy for Future Research Activity |
早急に実験動物レベルでの安定的な免疫機能解析のためのフローサイトメトリー条件を確立し、腫瘍モデルマウスでの解析を進めていきたい。そのために研究協力者との密な検討を続けていきたい
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| Causes of Carryover |
他研究で使用していた研究用抗体を使用するなどしたため、実際に購入する金額が見た目上少なくなっているが、今後必要な物品を購入することで、研究費を使用する予定である。
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