2019 Fiscal Year Annual Research Report
Development of new therapeutic agents targeting Rac1-GSPT1 axis in glioma
Project/Area Number |
18K16584
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Research Institution | Kobe University |
Principal Investigator |
石井 大嗣 神戸大学, 医学研究科, 医学研究員 (80622167)
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Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2020-03-31
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Keywords | Glioma / GSPT1 |
Outline of Annual Research Achievements |
まず、グリオーマ組織を用いてGSPT1の発現を免疫染色法を用いて解析した。GSPT1は、腫瘍細胞は細胞質に優位に発現しており、様々なグレードのグリオーマ細胞で非常に著明に陽性となり、グレードが上昇して悪性腫瘍ほど発現が高かった。正常脳での発現は非常に低く、ほぼすべての組織で正常のに比較して腫瘍では発現が増加していた。 また、mRNAの発現について解析すると、腫瘍周囲正常脳と比較して、腫瘍でも発現が上昇していた。しかし、グリオーマのグレードと発現量を比較してもグレード間での有意な発現の差は認めなかった。 ヌードマウス脳内にU87グリオーマ細胞を移植した腫瘍組織では非常に高度にGSPT1の発現上昇が認められた。以前に報告のあったGSPT1阻害剤であるCC885を腹腔内投与して治療すると、腫瘍組織ではGSPT1の発現が低下しており、細胞は空胞変性を起こし、アポトーシスを起こしていることが分かった。カスペースで染色すると、強く染色され、アポトーシスが誘導されていることが確認できた。U87 IVIS細胞をマウス脳に移植して、CC885で治療すると、腫瘍の蛍光量がコントロールに比較して低下しており、腫瘍の増大の抑制が生じていることが分かった。CC885の治療群とコントロールでマウスの生存期間を比較すると、コントロールに比べ、CC885投与群では有意に生存期間が延長した。また、GSPT1のノックダウンの細胞を移植すると、ノックダウンしていないparentのU87細胞を移植したマウスに比べると、有意に生存期間が延長し、GSPT1の機能低下により腫瘍の増大が抑制されていることが確認できた。GSPT1の阻害剤の既存薬剤スクリーニングを行ったところ、drug Xを同定した。In vitroでDrug XはGSPT1の発現を抑制し、細胞増殖も抑制した。現在マウスを用いた実験にて解析中である。
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