インスリン抵抗性異常を基盤とした子宮内膜脱落膜化不全と産科合併症の発症機序の解明

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K16814
• Research Institution: Juntendo University
• Principal Investigator: 尾崎 理恵 順天堂大学, 医学部, 助教 (40816708)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2021-03-31
• Keywords: ヒト子宮内膜間質細胞 / 脱落膜化 / PPARgamma / インスリン抵抗性 / pioglitazone

Outline of Annual Research Achievements

インスリン抵抗性の原因とされている遺伝子群にはInsulin Receptor, IRS-1,2,3,4, PI3kinase, Protein tyrosine phosphatase 1Bm Protein kinase C, PPAR gammaなどがある。申請者らは既に、候補遺伝子の中でインスリン抵抗性に関わるPPAR gammaとコアクチベーターであるPGC-1alpha（PPARγ coactivator 1-alpha）を、agonistの投与やsiRNAを用いて発現制御することで脱落膜化マーカーの発現が有意に変化することを見出した。
具体的にはヒト子宮内膜において、PPARgammaは子宮内膜脱落膜化とともに経時的に発現が低下していくことが分かった。
そこで、PPARgamma　agonistであり、インスリン抵抗性改善薬であるpioglitazoneを脱落膜化子宮内膜中に添加した。すると、pioglitazoneの高濃度の添加でPPARのgammaの発現が上昇し、逆に脱落膜化は有意に抑制されることが分かった。しかし、内服常用量として用いられる際に到達する血中濃度付近の低濃度の添加ではPPARgammaの発現は変わらず、脱落膜化マーカーの発現にも変化はなかった。
次に、siRNAを用いてPPARgammaとそのコアクチベーターであるPGC-1alphaをknockdownした内膜細胞を作製した。各培養細胞をプロゲステロンとcAMPを添加して脱落膜化させた。PPARgammaのknockdownでは脱落膜化は促進され、PGC-1alphaのknockdownでは抑制される相反する結果を得た。今後、RNA-Seqを用いた網羅解析によりPPARgammaおよびPGC-1alphaとその下流にあるインスリンシグナル系を明らかにし、ヒト子宮内膜の脱落膜化を制御する遺伝子系を明らかにする。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

脱落膜化制御機構についてはその一部分を明らかにすることができた。今年度は網羅解析を行い全体像を明らかにする必要があるため。また、来年度にかけて患者検体を用いたSNP解析を予定している。

Strategy for Future Research Activity

インスリン抵抗性の原因とされている遺伝子群にはInsulin Receptor, IRS-1,2,3,4, PI3kinase, Protein tyrosine phosphatase 1Bm Protein kinase C, PPAR gammaなどがある。当初の計画ではそのすべてについて脱落膜化に影響するか検証するよていであった。しかし、時間的、予算的にすべてを検証することは不可能であるため現在明らかになったPAPRgammaとその補酵素であるPGC1alphaを中心に今後解析をすすめていく予定である。

Causes of Carryover

抗ヒトPPARgammaPPARgamma抗体、抗ヒトPGC1alpha抗体などを購入する必要があるが、今年度の使用限度額を超過してしまうため、残額27,207円については次年度に繰り越すこととしたため。