2021 Fiscal Year Research-status Report
癌生存シグナルを標的とした外耳道癌に対する新規保存的治療法の開発
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18K16908
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| Research Institution | Toho University |
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Principal Investigator |
穐山 直太郎 東邦大学, 医学部, 講師 (90554238)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2023-03-31
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| Keywords | 癌生存シグナル / 外耳道扁平上皮癌 / EGF / PDK1 / エレクトロポレーション |
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| Outline of Annual Research Achievements |
epidermal growth factor receptor (EGFR)は外耳道扁平上皮癌の増大・浸潤に強く関わることが示唆されており、EGFRのエフェクター分子の一つであるphosphoinositide-dependent protein kinase-1 (PDPK1)は頭頸部扁平上皮癌など多くの癌で抗アポトーシス作用による癌生存シグナルとの関連性が示唆されており、新規治療標的として着目されている。外耳道EGF過剰発現マウスモデルを用いてEGFR/PDPK1シグナル阻害効果を検討した。
6週齢、雄のBALB/cマウスを用い、EGF発現ベクター（pCMV-hEGF-Flag）を外耳道にエレクトロポレーション法で導入し、外耳道EGF過剰発現マウスモデルを作製した。EGF発現ベクター導入群では内視鏡観察により外耳道の隆起性病が認められ、Flag染色によりマウス外耳道へのベクター導入が確認された。免疫組織学的解析では外耳道上皮におけるEGF、EGFR、PDPK1の発現上昇を認め、 細胞殖性マーカーのKi67陽性細胞率の上昇を認めた。 次に、本モデルを用い、PDK1阻害剤の腹腔内投与によるEGFR/PDPK1シグナルの阻害実験を行った。結果、PDPK1阻害剤投与群でEGF、EGFR、PDPK1、Ki67陽性率がすべて低下した。アポトーシス解析をcleaved caspase-3の免疫組織化学、terminal deoxy(d)-UTP nick end labeling (TUNEL)法により行ったところ、cleaved caspase-3陽性率およびTUNEL陽性率は上昇した。以上の結果から外耳道扁平上皮癌におけるEGFR/PDPK1シグナルの重要な役割を果たしており、EGFR/PDPK1シグナル阻害によりアポトーシスが誘導され抗腫瘍効果を発揮する可能性が示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
COVID19感染拡大に伴い研究環境および人員に制約が加わったため、解析にやや遅れを生じた。しかしながら、解析結果は着実に得られており、研究内容自体はの予定通り着実に進行しており、特に問題はない。
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| Strategy for Future Research Activity |
2022年10月開催予定の第32回日本耳科学会総会・学術講演会に向けて本研究の総括を行い、発表予定である。
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| Causes of Carryover |
予定していたタンパク阻害実験が行えなかったため、未使用額が生じた。次年度は試薬の購入、成果発表のための学術集会参加費用、論文作成・掲載費用に使用する予定である。
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