The novel lymphedema treatment using the plasma hemostasis and the antifibrosis antibody

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K16977
• Research Institution: Chiba University
• Principal Investigator: 山路 佳久 千葉大学, 医学部附属病院, 医員 (80400951)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: リンパ浮腫 / 線維化 / CD69 / myl9 / リンパ新生 / リンパ節移植

Outline of Annual Research Achievements

リンパ節郭清後の急性期、慢性期リンパ浮腫に対する外科的治療、いずれにおいても組織損傷からの治癒過程で組織の線維化が惹起され、筋線維芽細胞が増殖するにもかかわらず、リンパ鬱滞環境下での線維化並びに成熟リンパ管の新生障害の病態は解明されていない。リンパ流障害後の創傷治癒過程の解明と改善がリンパ浮腫の予防と新たな治療開発において重要である。
近年慢性炎症に引き続く線維化にCD69陽性炎症細胞と活性化された血小板から放出されるMyosin light chain(myl)9の結合が重要な役割を持つことが明らかになっている。初年度はCD69欠損マウスを用いて腹部リンパ流鬱滞モデルを作成し、線維化とリンパ管新生における通常マウスとの差異を検討した。リンパ鬱滞状態を作成したのちに、２週、１ヶ月、２ヶ月後に蛍光イメージングとαSMA染色と抗ポドプラニン抗体染色により線維化とリンパ管新生の評価を行なった。結果としてCD69欠損マウスにおいて有意にリンパ新生、線維化の形成が抑制されていた。
次にリンパ鬱滞部位に対する血管柄付きリンパ節移植によるリンパ新生の評価を行なった。通常マウスを用いて腹部リンパ鬱滞モデルを作成し、健側の血管柄付き鼠径リンパ節移植を行い、線維化とリンパ管新生の評価を行なったところ、リンパ新生が認められなかった群はリンパ新生が認められた群にくらべてリンパ節周囲の線維化が有意に多い結果であった。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

CD69欠損マウスの用意に想定以上に時間がかかったこと、またリンパ節移植では作成にかかる時間がかかること、評価を行うまで数ヶ月要することがあげられる。

Strategy for Future Research Activity

抗線維化治療の開発の基礎となる研究を進めていく。具体的には、CD69欠損マウスにリンパ節移植を行い、線維化とリンパ新生の評価を行う。また、プラズマ止血における抗線維化の効果を評価していく。そして、炎症状態にある生物でのmyl9血中濃度の動態を検索し、drug delivery systemを用いた抗線維化の効果判定を行う。

Causes of Carryover

実験が想定していた計画より遅れているため、本来使用される費用が次年度使用額として生じている。今後は実験をさらに進めて行き、使用する方針である。具体的には、CD69欠損マウスの作成にかかる費用、また線維化とリンパ新生の評価を行うための試料や薬剤、機器の購入を検討している。また、炎症状態にある生物でのmyl9血中濃度の測定のためのシステム構築、そしてdrug delivery systemの確立のための各種製剤費、論文や学会発表のための費用に使用する予定である。