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2019 Fiscal Year Annual Research Report

Involvement of SASP in bone microenvironment

Research Project

Project/Area Number 18K17214
Research InstitutionHyogo Medical University

Principal Investigator

玉岡 丈二  兵庫医科大学, 医学部, 助教 (60755578)

Project Period (FY) 2018-04-01 – 2020-03-31
Keywords骨微小環境 / SASP
Outline of Annual Research Achievements

老化は未解明な生命現象であり、骨リモデリングが行われる骨微小環境においても例外ではない。骨リモデリングは破骨細胞と骨芽細胞による連関した制御システムであり、このバランスの破綻がさまざまな骨疾患につながる。近年、老化を起こした細胞は、単に細胞増殖を停止しているのではなく、炎症性サイトカインなどさまざまなタンパク質を分泌していることが明らかになった。この分泌現象はSASP(senescence-associated secretory phenotype)と呼ばれているが、骨微小環境との関連の報告は少ない。
細胞はマクロファージ系破骨細胞前駆細胞株RAW264.7を用いた。RAW264.7を、5、10、20代継代培養(それぞれP5、P10、P20)した。細胞増殖能はWST-8 assayおよびmTORの発現をウエスタンブロット法(以下WB)で評価した。老化は細胞老化マーカーであるSA-βGal活性およびp53の発現をWBで評価した。破骨細胞分化への影響は、RANKL(50 ng/ml)の投与後、TRAP染色およびTRAP activity assayを行い、RANK、NFATc1の発現をWBで評価した。SASP因子(iNOS、HIF、TGF-β1)の発現をWBで評価し、また培養上清中のNOおよびIL-6産生量の測定を行った。
P20では、P5およびP10と比較してSA-βGal活性の増強およびp53発現の上昇を認め、複製老化を再現した。細胞増殖はP5が最も高く、次にP10、P20の順に低下し、mTOR発現も同様であった。RANKL投与によりP5、P10おけるTRAP活性は上昇するが、P20では上昇を認めなかった。また、P5、P10ではRANK、NFATc1のタンパク発現の上昇がみられたが、P20ではみられなかった。P20のSASP因子のタンパク発現の上昇を認め、培養上清中のNO、IL-6産生量は、継代数の増加に伴い増加がみられた。
破骨前駆細胞の老化により破骨細胞分化は抑制され、さらに、老化破骨前駆細胞はSASPを介して自己老化や分化抑制、さらに周囲に炎症を引き起こすことが考えられた。

  • Research Products

    (3 results)

All 2020 2019

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 2 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Osteonecrosis of the jaws caused by bisphosphonate treatment and oxidative stress in mice2019

    • Author(s)
      Tamaoka J, Takaoka K, Hattori H, Ueta M, Maeda H, Yamamura M, Yamanegi K, Noguchi K, Kishimoto H
    • Journal Title

      Experimental and Therapeutic Medicine

      Volume: 17 Pages: 1440-1448

    • DOI

      10.3892/etm.2018.7076

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Effects of TGF-β1 on the migration and morphology of RAW264.7 cells in vitro.2019

    • Author(s)
      Ueta M, Takaoka K, Yamamura M, Maeda H, Tamaoka J, Nakano Y, Noguchi K, Kishimoto H
    • Journal Title

      Molecular Medicine Reports

      Volume: 20 Pages: 4331-4339

    • DOI

      10.3892/mmr.2019.10662

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] 破骨細胞前駆細胞の老化におけるSASPへの影響2020

    • Author(s)
      服部洋一, 高岡一樹, 玉岡丈二, 上田美帆, 押谷将之, 野口一馬, 岸本裕充
    • Organizer
      第74回日本口腔科学会学術集会

URL: 

Published: 2021-01-27  

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