Development of a Root Surface Caries Preventive Material with Curcumin Peptide

2021 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18K17280
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 泉井 秀介 大阪大学, 歯学研究科, 招へい教員 (00806052)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: クルクミン / 歯周病 / Porphyromonas gingivalis / 外膜小胞

Outline of Annual Research Achievements

ウコンの抽出物であるクルクミンが、Porphyromonas gingivalis外膜小胞の細胞毒性作用からヒト歯肉上皮細胞(HGE)を保護するかを調べた。外膜小胞(OMVs) はPorphyromonas gingivalis ATCC33277、W50、W83をTSB培地を嫌気条件下で培養し、0.22μmのフィルターでろ過後、100,000xg、60分間、4度で遠心分離、BCA protein assay kitで濃度を調整、ヒト歯肉上皮(HGE)細胞を刺激するために使用した。炎症性サイトカインの発現はリアルタイム逆転写ポリメラーゼ連鎖反応法と酵素結合免 疫吸着検査法で調べた。また遊走能に対する効果はスクラッチ創傷法で検討した。さらにHGEとOMVsを共培養し、OMVsの付着や侵入への効果は共焦点顕微鏡を用 いた。クルクミンのHGEアポトーシスに対する効果も共焦点顕微鏡を用いて調べた。
Porphyromonas gingivalis ATCC３３２７７、W50、W83由来のOMVで刺激したHGE細胞におけるIL-6、IL-1β、TNF-αの遺伝子発現は、クルクミンによって用量依存的に有意に抑制され、タンパク質産生の抑制も認められ た。さらに、クルクミンは、OMVの細胞移動に対する細胞毒性作用を抑制した。またクルクミンは、用量依存的にOMVの細胞への付着と侵入、および細胞のアポ トーシス死を抑制した。これらの結果はクルクミンが、線毛タイプが異なるP. gingivalis 外膜小胞の細胞障害作用に対して顕著な抑制効果を示し、歯周病予防の可能性を示した。