土壌に潜む致死性アメーバ生息特性解析と新規無細胞培養法の開発

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K17349
• Research Institution: Hirosaki University
• Principal Investigator: 山内 可南子 弘前大学, 保健学研究科, 助教 (80740810)
• Project Period (FY): 2018-04-01 – 2022-03-31
• Keywords: 無菌培養

Outline of Annual Research Achievements

本研究は、環境下におけるバラムチアの生息特性を明らかにし、新たな培養法を構築する研究である。これまで報告されるバラムチア培養法は、グルコースを主な栄養成分とするBM-3や接着細胞を足場とした細胞培養法(RPMI1640)がある。共に富栄養の培地で、細菌が共生する環境由来バラムチアは、細菌有意の増殖により死滅する。そこで本研究では、①土壌中に生息するバラムチアの生息特性を明らかにし、②新たな無細胞液体培地の開発を行うことを目的としている。
平成30年度は、バラムチア生息土壌における栄養特性を明らかにし、令和元年度は、前年度までの生息特性の結果を基に複数条件の施策培地を用い、環境株及び臨床株の発育効果を検討し環境株の培養に成功した。令和2年度は、環境株に内在する細菌の除菌方法を模索するため、試作培地への抗生剤の添加を予定していたが、新型コロナウイルスの流行により、実験の継続が難しかったことから、今年度は論文の執筆を行いPalasitorogy reserchに投稿中である。試作培地への抗生剤の投与は、一般的に液体培地に用いられているペニシリン及びストレプトマイシンの添加を実施している。２種の抗生剤を段階希釈し、複数パターンで培養を行ったが、除菌効果は無効であることが明らかとなっている。
試作培地による環境株の培養には成功しているものの、細菌の除菌は完了していないため無菌培養は今後の検討課題である。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

世界的な新型コロナウイルスの流行により、研究資材の不足や教育現場のオンライン授業の整備などにより、十分な研究時間を確保することが難しかったため、遅れている。

Strategy for Future Research Activity

環境分離株の培養に成功していることから、無菌培養を目指し複数の抗生剤の添加を予定している。また、複数の臨床株を試作培地で培養し、増殖可能であるか確認する。

Causes of Carryover

COVID-19の影響による実験遅延の為、論文投稿の時期が遅れた。よって論文投稿費等、その他諸経費を繰り越した。