2020 Fiscal Year Annual Research Report
mRNA sorting into exosomes and its application for drug delivery
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18K18386
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
曽宮 正晴 大阪大学, 産業科学研究所, 助教 (50788974)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Keywords | DDS / エクソソーム / mRNA |
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| Outline of Annual Research Achievements |
mRNAをエクソソーム内に内封してmRNA送達DDSを開発するという当初の目標を達成するための研究を進めた。ウイルスタンパク質を使用することでmRNAをエクソソーム内に内封する事ができ、このエクソソームをレシピエント細胞に添加すると、目的であるレポーター遺伝子が発現することを確認した。さらに、mRNAにアプタマーを付与することで、細胞内での遺伝子発現を小分子で制御可能なことを見出した。
エクソソームによるmRNA送達のメカニズムを解析するために、新たに2種類の実験系を構築した。一つ目は、エクソソーム内に発光タグタンパク質を内封して、レシピエント細胞にエクソソームタンパク質が送達されるとレシピエント細胞が発光するというものである。もう一つは、エクソソーム内に転写活性化ドメインをもつタンパク質を内封し、レシピエント細胞に取り込まれて細胞質に移行すると、レシピエント細胞内でレポーター遺伝子は発現するというものである。どちらの実験系においても、エクソソームによる薬物送達を定量的に評価することが可能となり、エクソソーム自体がもつ薬物送達効率は必ずしも高くない事、ウイルス由来膜融合タンパク質をエクソソームに提示することで送達効率が飛躍的に向上することが明らかとなった。
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