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2020 Fiscal Year Annual Research Report

Construction and functional expression of 3-dimensional vascularized liver tissue models by innovations in materials, processes, and devices

Research Project

Project/Area Number 18K18969
Research InstitutionChiba University

Principal Investigator

山田 真澄  千葉大学, 大学院工学研究院, 准教授 (30546784)

Project Period (FY) 2018-06-29 – 2021-03-31
Keywords生体組織工学 / 肝細胞 / ハイドロゲル
Outline of Annual Research Achievements

本研究の最終年度に当たる2020年度には,生体外においてより高度に機能する肝組織の形成を目指し,これまでのスポンジ状ハイドロゲル材料の作製手法を用いた潅流培養系における至適条件の探索を実施した。またこれらに加えて,繊維状コラーゲン微粒子や断片化コラーゲンファイバーを内包した3次元的肝細胞培養系や,フロースルー型のスフェロイド潅流培養系などの開発を行った。スポンジ状ハイドロゲルを構成する材料としては,これまでに使用した光架橋性ゼラチンに加えて,今年度はフィブリンを採用し,血管内皮細胞を複合化した組織の形成を行った。アルギン酸を犠牲材料として用いることで多孔性のフィブリンゲルの形成が確認されたため,マイクロ流体デバイスへの複合化を行い,潅流培養系への適用を行ったところ,血管ネットワーク様構造の形成が確認された。また,繊維化コラーゲン微粒子を用いた培養系は,特に初代肝細胞の培養において効果を発揮することが確認されたほか,断片化コラーゲンファイバーを用いた実験系では,定量的PCR法によって肝細胞の機能上昇が確認されたのみならず,免疫染色によって肝細胞極性の再現に関わるタンパク質の発現向上が観察された。またさらに,流路に統合したフロースルー型の培養系を開発し,潅流培養によって肝細胞の生存率や機能の向上が確認された。これらの実験結果は,生きたまま細胞を導できる,あるいは細胞同士の密度を厳密に制御できる新規バイオマテリアルを用い,それらをマイクロ流体デバイスに統合した上で,さらに流量を制御したかん流培養のプロセスを最適化することが,肝細胞培養および生体外における肝細胞組織モデル形成において有用であることを示唆するものである。そのためこれらの手法は,特に創薬研究における応用が期待されうるものと期待される。

  • Research Products

    (8 results)

All 2021 2020 Other

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (6 results) (of which Invited: 1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Flow-through Cell Culture System Using Microcavities Embedded in Spongelike PDMS Matrix2020

    • Author(s)
      Mai Takagi, Masumi Yamada, and Minoru Seki
    • Journal Title

      Proceedings of the 24th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences

      Volume: - Pages: 849-850

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 断片化コラーゲンマイクロファイバーの高効率調製とシート状組織形成への応用2021

    • Author(s)
      山中啓吾,鵜頭理恵,山田 真澄,関 実
    • Organizer
      化学工学会第86年会
  • [Presentation] ポーラスマイクロウェル統合型流路を用いる肝細胞の3次元かん流培養系2021

    • Author(s)
      高木真惟,山田真澄,鵜頭理恵,関 実
    • Organizer
      2020年度シンポジウム:細胞アッセイ技術の現状と将来
  • [Presentation] フロースルー多孔性チャンバーを利用したスフェロイドの灌流培養技術2020

    • Author(s)
      高木真惟,山田真澄,鵜頭理恵,関 実
    • Organizer
      化学とマイクロ・ナノシステム学会第42回研究会
  • [Presentation] マイクロ流体デバイスを用いた細胞分離・培養・操作システムの開発2020

    • Author(s)
      山田真澄
    • Organizer
      化学とマイクロ・ナノシステム学会第42回研究会
    • Invited
  • [Presentation] 流路統合型多孔性マイクロウェルを利用した動物細胞の三次元的培養技術2020

    • Author(s)
      高木真惟,山田真澄,関 実
    • Organizer
      化学工学会第51回秋季大会
  • [Presentation] Flow-through Cell Culture System Using Microcavities Embedded in Spongelike PDMS Matrix2020

    • Author(s)
      Mai Takagi, Masumi Yamada, and Minoru Seki
    • Organizer
      The 24th International Conference on Miniaturized Systems for Chemistry and Life Sciences (MicroTAS 2020)
  • [Remarks] バイオプロセス化学研究室HP

    • URL

      http://chem.tf.chiba-u.jp/gacb01/

URL: 

Published: 2022-12-28  

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