2019 Fiscal Year Annual Research Report
Study on a new ajuvant that induce memory T cells efficiently
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18K19268
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
服部 雅一 京都大学, 医学研究科, 特定教授 (40211479)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
福島 祐二 京都大学, 医学研究科, 特定助教 (90583146)
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| Project Period (FY) |
2018-06-29 – 2020-03-31
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| Keywords | 免疫老化 / 老化関連T細胞 / CD153リバースシグナル / CD3複合体 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
１．マウスCD153細胞外ドメイン発現プラスミド投与実験
タグを付加したマウスCD153細胞外ドメイン発現プラスミドをマウスに等して抗体産生に対する影響を調べたが、期待していたようなメモリー増強反応を確認することができなかった。投与したマウスの血中におけるCD153量についてもモニターを行ったが、検出することできなかった。プラスミド投与では十分量のCD153を体内で発現させることができなかったため、抗体産生に関わるメモリー反応を増強できなかった可能性が示唆される。
２．CD153リバースシグナルの実体解明
メモリーT細胞の分化・生存に必須とされるCD153（CD30リガンド）を介するCD153リバースシグナルの実体やシグナル伝達に関わるメカニズムを解明するためにCD153会合分子の解析を行った。解析にはCD153のN末領域にClover-GFP蛋白を融合させたClov-CD153を強制発現させたEL-4細胞を用い、この細胞の膜蛋白をビオチン化した後、GFPに対する抗体を用いて免疫沈降を行い、会合している分子をTOF-Massにて解析した。その結果、CD153に会合する分子としてはCofilin-1、PAICS (ADE2)およびCD3複合体（e,d,z鎖）が同定された。CD3複合体との会合についてはその後の解析によりCD3g鎖も会合していること、TCRαβ鎖はこの会合体には含まれないことが明らかになった。Clov-CD153/EL-4細胞ではTCR刺激後のIL-2産生が有意に阻害されるが、CD153とCD3複合体との会合がその阻害現象に大きく関与しているものと示唆される。さらに本年度はCD153リバースシグナルの実体解明のため、SA-T細胞を用いてこれらにCD153リバースシグナル入れた後の遺伝子変化をRNAseqについて解析を行った（結果は現在、解析中）。
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