2019 Fiscal Year Annual Research Report
Molecular mechanism for the acquisition of multipotency by ribosome
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18K19344
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| Research Institution | Kumamoto University |
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Principal Investigator |
太田 訓正 熊本大学, 大学院生命科学研究部(医), 准教授 (90244128)
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| Project Period (FY) |
2018-06-29 – 2020-03-31
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| Keywords | リボソーム / 多能性獲得 / リプログラミング / ヒト癌細胞 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
リボソームをヒト癌細胞に取り込ませ、細胞内での変化を免疫染色法とwestern blotで調べた。申請者が確立した実験方法は、とても簡便な方法であり、細胞塊形成活性の判定を容易にフォローできる。１ ）ヒト癌細胞（MCF7）を培養する。２）トリプシン＋EDTA処理を行い、細胞をシングルセルになるように懸濁する。３）トリプシン阻害液を加えて反応を止め、細胞数をカウントし、予めサンプルを加えておいた4 well dishに細胞を加え、数日後に細胞塊形成を観察する。
ヒト由来の乳がん細胞、肺癌細胞、異癌細胞細胞をバイオリソースセンターから購入した。各々の細胞を上記した方法に従ってリボソーム を取り込ませると、どの細胞も細胞塊を形成し、細胞増殖を停止した。そこで、本研究では、最も細胞塊形成率が良かった乳がん細胞MCF7に着目し、リボソームの癌細胞に対する影響を調べた。
１）BrdUを取り込ませ、免疫染色法を行ったところ、細胞の増殖が明らかに減少していた。。２）細胞周期を免疫染色法で調べたところ、Go, GI期の細胞がコントロール細胞と比べ、増加していた。３）EMTマーカーである、TGFb1とSnail1の発現をwestern blotで解析したところ、リボソーム を取り込んだ癌細胞では、両分子の発現が誘導されていた。４）癌抑制因子であるp53の発現も、リボソーム を取り込んだ癌細胞では、増加していた。
以上の結果から、半永久的に増殖を続ける癌細胞でさえ、リボソーム を取り込むと増殖を停止することから、将来はリボソーム を安心・安全な抗がん剤の基盤物質として用いることが期待できる。
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