• Search Research Projects
  • Search Researchers
  • How to Use
  1. Back to project page

2018 Fiscal Year Research-status Report

ストレスセンサーKeap1のタンパク質構造解析に基づく生体防御機構の解明

Research Project

Project/Area Number 18K19417
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

山本 雅之  東北大学, 医学系研究科, 教授 (50166823)

Project Period (FY) 2018-06-29 – 2020-03-31
KeywordsNrf2
Outline of Annual Research Achievements

酸化ストレスや外来異物に対する生体応答系の破綻は、様々な疾患発症と密接に関わる。このようなストレス関連疾患の発症を未然に防ぐ目的で、生体は環境ストレスに対して迅速に応答し、恒常性を維持する仕組みを保持している。Nrf2は酸化ストレスや異物・毒物代謝に関わる酵素群の遺伝子を統一的に制御しており、生体防御の要として働く転写因子である。Nrf2活性化による強力な生体防御機能の増強作用は大きな注目を浴びており、その作用の様々な疾患の予防・治療への応用を目指して、国内外で多くのNrf2誘導剤の開発計画が進行している。Nrf2は、非ストレス刺激下ではKeap1-Cullin3(Cul3)を構成因子とするユビキチンE3リガーゼ複合体によりユビキチン化され、プロテアソームにより迅速に分解されている。Keap1は、ユビキチンリガーゼ複合体の基質認識アダプターとして機能するだけではなく、外来性ストレスのセンサー分子としても機能する。例えば、Keap1が酸化ストレス刺激を感知すると、同複合体はユビキチンリガーゼ活性を失いNrf2のユビキチン化反応は停止する。その結果、分解を免れて安定化したNrf2は核内に蓄積して、抗酸化剤応答配列(ARE)に結合し、種々の標的遺伝子の転写を活性化する。
当該年度は、ストレス応答においてNrf2活性化を惹起する分子基盤、特にKeap1によるNrf2のユビキチン化反応に対する調節機構の解明を目指し、X線結晶構造解析およびクライオ電子顕微鏡解析を行った。X線結晶構造解析については、現在までにKeap1-Cul3複合体の共結晶の取得に成功し、現在より高品質の結晶の取得のための条件検討を行っている。また、クライオ電子顕微鏡解析については、Keap1-Cul3複合体の二次元平均像の取得に成功し、現在より分散性の高いサンプル調整の条件検討を進めている。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

計画通り、X線結晶構造解析およびクライオ電子顕微鏡解析を進めることができた。

Strategy for Future Research Activity

X線結晶構造解析については、今後、現在より高品質の結晶の取得のための条件検討を行う。また、クライオ電子顕微鏡解析については、今後より分散性の高い高品質のサンプル調整の条件検討を進める。
この他、Keap1-Cul3複合体の構造を明らかにすることと並行して、Nrf2誘導剤がKeap1センサーシステイン残基を修飾することにより、Keap1-Cul3複合体にどのような構造変化を引き起こすのか明らかにして、細胞内で実際にNrf2ユビキチン化を停止する分子メカニズムの解明に挑戦する。解析方法は、結晶構造解析・クライオ電子顕微鏡法に加えて、動的構造変化を捉えるためNMRを用いた構造解析を試みる。以上の解析方法を駆使して、Nrf2誘導剤の有無によるKeap1タンパク質の動的な構造変化を明らかにし、Keap1によるユビキチンリガーゼ活性の調節機構解明を目指す。

Causes of Carryover

初年度にNMR解析によるKeap1-Cul3複合体の構造解析を行う予定だったが、X線結晶構造解析およびクライオ電子顕微鏡解析が順調に進んだため、計画を変更し、この2解析に注力したため、未使用額が生じた。このため、NMR解析は次年度に行うこととし、未使用額はその経費に充てることにしたい。

  • Research Products

    (29 results)

All 2019 2018 Other

All Journal Article (17 results) (of which Int'l Joint Research: 11 results,  Peer Reviewed: 17 results) Presentation (10 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results,  Invited: 10 results) Book (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Nrf2 deficiency aggravates the increase in osteoclastogenesis and bone loss induced by inorganic arsenic2019

    • Author(s)
      Liu Zhiyuan、Hou Yongyong、Li Lu、Yang Yang、Jia Jingkun、Hong Zhixuan、Li Tingfeng、Xu Yuanyuan、Fu Jingqi、Sun Yongxin、Yamamoto Masayuki、Wang Huihui、Pi Jingbo
    • Journal Title

      Toxicology and Applied Pharmacology

      Volume: 367 Pages: 62~70

    • DOI

      10.1016/j.taap.2019.02.003

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Nrf2 Suppresses Allergic Lung Inflammation by Attenuating the Type 2 Innate Lymphoid Cell Response2019

    • Author(s)
      Nagashima Ryuichi、Kosai Hitomi、Masuo Masahiro、Izumiyama Keiko、Noshikawaji Taketo、Morimoto Motoko、Kumaki Satoru、Miyazaki Yasunari、Motohashi Hozumi、Yamamoto Masayuki、Tanaka Nobuyuki
    • Journal Title

      The Journal of Immunology

      Volume: 202 Pages: 1331~1339

    • DOI

      10.4049/jimmunol.1801180

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Nrf2 represses the onset of type 1 diabetes in non-obese diabetic mice2019

    • Author(s)
      Yagishita Yoko、Uruno Akira、Chartoumpekis Dionysios V、Kensler Thomas W、Yamamoto Masayuki
    • Journal Title

      Journal of Endocrinology

      Volume: 印刷中 Pages: 403~416

    • DOI

      10.1530/JOE-18-0355

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Sulforaphane enriched transcriptome of lung mitochondrial energy metabolism and provided pulmonary injury protection via Nrf2 in mice2019

    • Author(s)
      Cho Hye-Youn、Miller-DeGraff Laura、Blankenship-Paris Terry、Wang Xuting、Bell Douglas A.、Lih Fred、Deterding Leesa、Panduri Vijayalakshmi、Morgan Daniel L.、Yamamoto Masayuki、Reddy Anita J.、Talalay Paul、Kleeberger Steven R.
    • Journal Title

      Toxicology and Applied Pharmacology

      Volume: 364 Pages: 29~44

    • DOI

      10.1016/j.taap.2018.12.004

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Structural instability of IκB kinase β promotes autophagic degradation through enhancement of Keap1 binding2018

    • Author(s)
      Kanamoto Mayu、Tsuchiya Yoshihiro、Nakao Yuki、Suzuki Takafumi、Motohashi Hozumi、Yamamoto Masayuki、Kamata Hideaki
    • Journal Title

      PLOS ONE

      Volume: 13 Pages: e0203978

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0203978

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Sulforaphane ameliorates steroid insensitivity through an Nrf2-dependent pathway in cigarette smoke-exposed asthmatic mice2018

    • Author(s)
      Sakurai Hirofumi、Morishima Yuko、Ishii Yukio、Yoshida Kazufumi、Nakajima Masayuki、Tsunoda Yoshiya、Hayashi Shih-Yuan、Kiwamoto Takumi、Matsuno Yosuke、Kawaguchi Mio、Yamamoto Masayuki、Hizawa Nobuyuki
    • Journal Title

      Free Radical Biology and Medicine

      Volume: 129 Pages: 473~485

    • DOI

      10.1016/j.freeradbiomed.2018.10.400

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Roles of the KEAP1-NRF2 system in mammalian skin exposed to UV radiation2018

    • Author(s)
      Ikehata Hironobu、Yamamoto Masayuki
    • Journal Title

      Toxicology and Applied Pharmacology

      Volume: 360 Pages: 69~77

    • DOI

      10.1016/j.taap.2018.09.038

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] NRF2 mitigates acute alcohol-induced hepatic and pancreatic injury in mice2018

    • Author(s)
      Sun Jing、Fu Jingqi、Zhong Yang、Li Lu、Chen Chengjie、Wang Xiaolei、Wang Linlin、Hou Yongyong、Wang Huihui、Zhao Rui、Zhang Xixuan、Yamamoto Masayuki、Xu Yuanyuan、Pi Jingbo
    • Journal Title

      Food and Chemical Toxicology

      Volume: 121 Pages: 495~503

    • DOI

      10.1016/j.fct.2018.09.042

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Nrf2 Activation Ameliorates Hepatotoxicity Induced by a Heme Synthesis Inhibitor2018

    • Author(s)
      Taguchi Keiko、Masui Saho、Itoh Tohru、Miyajima Atsushi、Yamamoto Masayuki
    • Journal Title

      Toxicological Sciences

      Volume: 167 Pages: 227~238

    • DOI

      10.1093/toxsci/kfy233

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Deficiency in the transcription factor NRF2 worsens inflammatory parameters in a mouse model with combined tauopathy and amyloidopathy2018

    • Author(s)
      Rojo Ana I.、Pajares Marta、Garcia-Yague Angel J.、Buendia Izaskun、Van Leuven Fred、Yamamoto Masayuki、Lopez Manuela G.、Cuadrado Antonio
    • Journal Title

      Redox Biology

      Volume: 18 Pages: 173~180

    • DOI

      10.1016/j.redox.2018.07.006

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] C151 in KEAP1 is the main cysteine sensor for the cyanoenone class of NRF2 activators, irrespective of molecular size or shape2018

    • Author(s)
      Dayalan Naidu Sharadha、Muramatsu Aki、Saito Ryota、Asami Soichiro、Honda Tadashi、Hosoya Tomonori、Itoh Ken、Yamamoto Masayuki、Suzuki Takafumi、Dinkova-Kostova Albena T.
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 8 Pages: 8037

    • DOI

      10.1038/s41598-018-26269-9

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Genetic inactivation of Nrf2 prevents clonal expansion of initiated cells in a nutritional model of rat hepatocarcinogenesis2018

    • Author(s)
      Orru Claudia、Szydlowska Marta、Taguchi Keiko、Zavattari Patrizia、Perra Andrea、Yamamoto Masayuki、Columbano Amedeo
    • Journal Title

      Journal of Hepatology

      Volume: 69 Pages: 635~643

    • DOI

      10.1016/j.jhep.2018.05.010

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] NFE2-Related Transcription Factor 2 Coordinates Antioxidant Defense with Thyroglobulin Production and Iodination in the Thyroid Gland2018

    • Author(s)
      Ziros PG.、Habeos IG.、Chartoumpekis DV.、Ntalampyra E、Somm E、Renaud CO.、Bongiovanni M、Trougakos IP.、Yamamoto M、Kensler TW.、Santisteban P、Carrasco N、Ris-Stalpers C、Amendola E、Liao XH、Rossich L、Thomasz L、Juvenal GJ.、Refetoff S、Sykiotis GP
    • Journal Title

      Thyroid

      Volume: 28 Pages: 780~798

    • DOI

      10.1089/thy.2018.0018

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] The KEAP1-NRF2 System: a Thiol-Based Sensor-Effector Apparatus for Maintaining Redox Homeostasis2018

    • Author(s)
      Yamamoto Masayuki、Kensler Thomas W.、Motohashi Hozumi
    • Journal Title

      Physiological Reviews

      Volume: 98 Pages: 1169~1203

    • DOI

      10.1152/physrev.00023.2017

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Phenethyl Isothiocyanate, a Dual Activator of Transcription Factors NRF2 and HSF12018

    • Author(s)
      Dayalan Naidu Sharadha、Suzuki Takafumi、Yamamoto Masayuki、Fahey Jed W.、Dinkova-Kostova Albena T.
    • Journal Title

      Molecular Nutrition & Food Research

      Volume: 62 Pages: 1700908~1700908

    • DOI

      10.1002/mnfr.201700908

    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Hyperactivation of Nrf2 leads to hypoplasia of bone in vivo2018

    • Author(s)
      Yoshida Eiki、Suzuki Takafumi、Morita Masanobu、Taguchi Keiko、Tsuchida Kohei、Motohashi Hozumi、Doita Minoru、Yamamoto Masayuki
    • Journal Title

      Genes to Cells

      Volume: 23 Pages: 386~392

    • DOI

      10.1111/gtc.12579

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] KEAP1 inhibition is neuroprotective and suppresses the development of epilepsy2018

    • Author(s)
      Shekh-Ahmad Tawfeeq、Eckel Ramona、Dayalan Naidu Sharadha、Higgins Maureen、Yamamoto Masayuki、Dinkova-Kostova Albena T、Kovac Stjepana、Abramov Andrey Y、Walker Matthew C
    • Journal Title

      Brain

      Volume: 141 Pages: 1390~1403

    • DOI

      10.1093/brain/awy071

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] The Keap1-Nrf2 System for Understanding of Diseases and Drug Development2018

    • Author(s)
      Yamamoto M
    • Organizer
      World Congress of Basic and Clinical Pharmacology (WCP2018)
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] KEAP1-NRF2システムと病態・創薬2018

    • Author(s)
      山本雅之
    • Organizer
      バルドキソロン全国研究会
    • Invited
  • [Presentation] KEAP1-NRF2 システムとがんの治療2018

    • Author(s)
      山本雅之
    • Organizer
      秋田大学病院がんプロ講演
    • Invited
  • [Presentation] KEAP1-NRF2 Regulatory Pathway for Environmental Stress Response2018

    • Author(s)
      Yamamoto M
    • Organizer
      Environmental Health and Toxicology meeting
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Keap1-Nrf2制御系の構造生物学的アプローチと病態2018

    • Author(s)
      山本雅之
    • Organizer
      第42回蛋白質と酸素の構造と機能に関する九州シンポジウム
    • Invited
  • [Presentation] Nrf2 and its future2018

    • Author(s)
      Yamamoto M
    • Organizer
      EUROTOX2018
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] KEAP1-NRF2 System Regulating Cellular Oxidative Stress Response2018

    • Author(s)
      Yamamoto M
    • Organizer
      Nrf2 Seminar, Faculty of Pharmacy Paris Sud
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] がんの生物学と医学におけるKEAP1-NRF2制御系の役割2018

    • Author(s)
      山本雅之
    • Organizer
      第77回日本癌学会
    • Invited
  • [Presentation] KEAP1-NRF2 System Regulating Oxidative Stress Response2018

    • Author(s)
      Yamamoto M
    • Organizer
      NHRI-ToMMo conference
    • Int'l Joint Research / Invited
  • [Presentation] Roles KEAP1-NRF2 System Plays in Neurosciences and Diseases2018

    • Author(s)
      Yamamoto M
    • Organizer
      Stanford University symposium
    • Invited
  • [Book] 人体の細胞生物学 : カラー図解 第3章3.遺伝子発現の調節2018

    • Author(s)
      鈴木隆史、山本雅之
    • Total Pages
      271
    • Publisher
      日本医事新報社
    • ISBN
      978-4-7849-3232-0
  • [Remarks] 東北大学大学院医学系研究科 医化学分野

    • URL

      http://www.dmbc.med.tohoku.ac.jp/official/index.html

URL: 

Published: 2019-12-27  

Information User Guide FAQ News Terms of Use Attribution of KAKENHI

Powered by NII kakenhi