2019 Fiscal Year Annual Research Report
Development of a novel therapeutics targeting amylin oligomers for diabetes mellitus
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18K19522
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| Research Institution | Oita University |
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Principal Investigator |
松原 悦朗 大分大学, 医学部, 教授 (70219468)
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| Project Period (FY) |
2018-06-29 – 2020-03-31
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| Keywords | アミリン / オリゴマー |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Aβオリゴマー特異的抗体(72D9-6H4クローン)はAβ3-merと5-merに共通のコンフォメーションを特異的に認識する抗体であるが、ドットブロット解析でアミリンオリゴマー（Amylin 1-18もしくはAmylin 8-37から作製）も認識することが明らかとなった。II型糖尿病をアルツハイマー病における神経変性機構と共通の発症基盤を有するアミリンオリゴマーによるコンフォメーション病との作業仮説を検証するため、その細胞毒性を培養膵島膵ベータ細胞で検証した。アミリンオリゴマーとAβオリゴマーを添加後、細胞毒性をLDHアッセイで検証したところ両者とも神経毒性証明には至らなかった。この現象はAβオリゴマー添加時の培養神経細胞でもしばしば経験される事象であったため、細胞膜ポア形成によるLDH逸脱には至っていないこと、それ以前の神経変性が惹起されているのではないかと想定し、同条件でトリパンブルー染色を試みた。アミリンの1-18部分のペプチドとアミリンの8-37部分では染色像が異なり、後者で細胞染色像と凝集像が目立ち、細胞毒性が強いことが明らかとなった。興味深いことにAβオリゴマー添加でもアミリンの8-37部分添加と同等の神経毒性が観察された。この神経毒性はAβオリゴマー特異的抗体(72D9-6H4クローン)の同時添加で中和されることから、Aβオリゴマーと共通した毒性発現機序が存在することを明らかとなった。しかしながら、細胞内移行効果を有するマイクロ抗体ではアミリン毒性中和効果が確認できておらず、同じ毒性発現機構が想定されたにもかかわらず、その作用発現に乖離がでる原因究明に至らなかった。今後の課題である。
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[Journal Article] Tyrosine pre-transfer RNA fragments are linked to p53-dependent neuronal cell death via PKM2.2020
Author(s)
Inoue M, Hada K, Shiraishi H, Yatsuka H, Fujinami H, Morisaki I, Nishida Y, Matsubara E, Ishitani T, Hanada R, Matsumoto M, Penninger JM, Ihara K, Hanada T.
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun.
Volume: 525
Pages: 726-732
DOI
Peer Reviewed
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