To elucidate the mechanisms of carcinogenesis and invasion of bladder cancer via ASIC / ENaC signal pathway

2020 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 18K19598
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 西山 博之 筑波大学, 医学医療系, 教授 (20324642)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小島 崇宏 筑波大学, 医学医療系, 准教授 (40626892) ; 神鳥 周也 筑波大学, 医学医療系, 講師 (50707825) ; 高岡 栄一郎 国際医療福祉大学, 医学部, 准教授 (50625340)
• Project Period (FY): 2018-06-29 – 2021-03-31
• Keywords: 膀胱発癌 / ASIC / ENaC / 感覚受容体

Outline of Annual Research Achievements

膀胱上皮におけるASIC/ ENaCなどの感覚受容体が非神経系上皮性腫瘍の発生や悪性化に関与するのかという仮説に対し、排尿障害モデル動物におけるASIC/ ENaCの発現異常と腫瘍の悪性化との関連性を明らかにすることを目的に研究を行った。高齢女性モデルとして卵巣摘除マウス（OVXマウス）、高齢男性モデルとして下部尿路閉塞（BOO）ラット用いてそれらにBBN発癌を行い、ASIC/ENaCの発現変化や病理組織学変化を解析し、膀胱癌の発癌や浸潤との関連性について研究した。下部尿路閉塞モデルはモデル作成が安定せず（長期生存が難しい点）、発癌実験に至らなかったため、OVXマウスをメインに研究を進めた。OVXマ
ウスの作成は8週齢femaleC57BL/6 miceを用い、Isoflurane全身麻酔下に背面切開にて両側卵巣を摘除長期生存を確認した。コントロールマウスを用いたBBN濃度と発癌フェノタイプの検証では初めに行ったBBN濃度では発癌フェノタイプに一定の特徴が認められなかったためBBN濃度を変更して実験を進めている。コントロールマウスモデルの作成6週後、8週後、12週後でそれぞれsacrificeし、膀胱全層、膀胱粘膜上皮、膀胱筋層検体パネルを作成しこれらを用いたASIC/ENaCやそれ以外の病理組織学的所見、免疫染色、RT-PCR, western blotを行った。なおコントロール群（OVX群、Sham群でBBN飲水を行っていない自然観察群）に対する膀胱組織評価、感覚受容体の発現評価（RTPCR)は別途行っており、コントロールデータとして採取した。