死後髄液のNMRモード解析を用いた頭蓋内傷病変の新規検査法の開発

2020 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K19705
• Research Institution: Nippon Medical School
• Principal Investigator: 平川 慶子 日本医科大学, 医学部, 非常勤講師 (30165162)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 金涌 佳雅 日本医科大学, 大学院医学研究科, 大学院教授 (80465343) ; 小池 薫 京都大学, 医学研究科, 名誉教授 (10267164) ; 足立 好司 日本医科大学, 医学部, 准教授 (00231928) ; 山崎 峰雄 日本医科大学, 医学部, 教授 (10277577) ; 早川 秀幸 日本医科大学, 大学院医学研究科, 研究生 (10373052) ; 柚木 知之 京都大学, 医学研究科, 助教 (50639094)
• Project Period (FY): 2018-06-29 – 2022-03-31
• Keywords: 死体 / 髄液 / NMR / モード解析 / 頭蓋内傷病変

Outline of Annual Research Achievements

法医実務における死体検案時には髄液検査が日常的に行われているが、その目的はクモ膜下出血等の鑑別にとどまっている。日本では法医解剖率が低く、死亡時画像検査も異状死全例には実施されていないので、死後髄液検査で頭蓋内傷病変の種類や重症度を評価できるようになれば、法医実務上の利用価値は極めて高い。
本課題では、我々が開発したNMRモード解析法を死後髄液検査に応用することにより、１）頭蓋内傷病変の傷病名を識別できるか、２）死因が、脳浮腫、脳ヘルニア、脳死、神経細胞傷害、脳循環代謝障害などの重篤な頭蓋内病態であると推定できるか、検討することとした。
新型コロナウィルス感染症の蔓延による研究活動の自粛や本学におけるNMR装置および実験施設のリニューアル工事の影響を受け、令和2年度は予定通りに研究が進まなかったが、今後に向けて、研究実施に必要な東京都監察医務院および日本医科大学の研究倫理委員会への研究実施の承認申請手続きを進めると共に、「NMRモード解析法」を検体検査技術として実用化するために解決すべき技術的な課題について、令和元年度に引き続き、アルブミン溶液やヒト標準血清を用いた基礎的検討を行った。

Current Status of Research Progress

4: Progress in research has been delayed.

Reason

本研究は、ヒトおよびヒト死体由来の試料、病歴情報等を取り扱うため、検体を採取する東京都監察医務院、日本医科大学の研究倫理委員会の承認を経て、実施する必要がある。東京都監察医務院に関しては、本研究の予備的検討を開始する際に倫理委員会の承認を受けていたが、今後の研究実施がスムーズに進むよう、計画を見直して新規研究として承認申請を行った。令和3年度早々には事務手続きが完了し、髄液サンプルの収集が開始できる見込みである。
日本医科大学においては、学校法人日本医科大学臨床研究審査委員会による承認が必要であるが、本研究で取り扱う死後髄液の研究対象者は全て死者であることから、検体採取の各機関では代諾者たる遺族関係者に説明と同意が必要であるが、身元不明死体の場合や解剖前に遺族と接触できる機会が乏しいことが多いという法医実務の現状から、学校法人日本医科大学臨床研究審査委員会と協議し、「人を対象とする医学系研究に関する倫理指針」の規定に基づき、研究対象者等が拒否できる機会を保障する措置（オプトアウト）を確実に講ずるものとすることとした。また、日本医科大学武蔵小杉病院および千葉北総病院における「臨床検体としての髄液」の入手に関しては、研究対象者が本研究に参加する前に、説明同意文書を用いて十分説明し、理解を得た上で、本人あるいは代諾者から参加についてインフォームド・コンセントあるいはアセントを得ることとした。令和3年5月には審査申請する予定である。
また、「NMRモード解析法」を検体検査技術として実用化するために解決すべき技術的な課題について、令和元年度に引き続き、アルブミンやヒト標準血清を用いた基礎的実験を行い、髄液等生物サンプルに適した測定試料の前処理、NMR計測条件等、新規検査法として必要とされる要素技術の開発を行った。

Strategy for Future Research Activity

東京都監察医務院の倫理委員会および学校法人日本医科大学臨床研究審査委員会の承認が得られ次第、ただちに髄液サンプルの収集を開始し、順次NMR計測を開始する。これまでに検討した予備的結果を踏まえて死後髄液の分析に適した「NMRモード解析法」の詳細な手順を決定し文書化する。
一定数のサンプルについてNMR計測データが揃ったところで、「NMRモード解析法」を行い、１）頭蓋内傷病変の傷病名を識別できるか、２）死因が、脳浮腫、脳ヘルニア、脳死、神経細胞傷害、脳循環代謝障害などの重篤な頭蓋内病態であると推定できるか、検討する予定である。
以上の結果をとりまとめ、NMRモード解析法を用いた死後髄液検査で、頭蓋内傷病変の種類や重症度を評価できるか、法医実務上としての利用価値を評価する。

Causes of Carryover

令和2年度は、新型コロナウィルス感染症の蔓延により、研究代表者ならびに研究分担者が皆非常時の業務対応に追われ、研究活動に必要な時間を確保することが困難であった。また、また令和2年度上半期は、主たる研究実施場所である磁気共鳴分析室のリニューアル工事が実施されたため、NMR装置を用いた実験研究を行うことができなかった。令和3年度上四半期中には髄液サンプルの本格収集を開始し、「死後髄液」および「臨床検体としての髄液」の「NMRモード解析」を行う予定である。令和3年度中には研究成果をまとめて論文報告する予定であり、論文投稿、英文校正等に必要な費用を令和3年度に使用する予定である。