習慣的多量飲酒による大腸疾患のリスク増大への腸内細菌の関わり

2018 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 18K19721
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 中山 亨 東北大学, 工学研究科, 教授 (80268523)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 大平 英夫 神戸学院大学, 栄養学部, 准教授 (40351762)
• Project Period (FY): 2018-06-29 – 2021-03-31
• Keywords: 酸化ストレス / 腸内細菌 / アルコール / 飲酒習慣

Outline of Annual Research Achievements

習慣的な多量飲酒は種々のがんリスク因子であり，その1つに大腸がんがあげられる．国内でもアルコール依存症患者の大腸の腺腫及びがんの発見率は顕著に高いことが報告されているが，その機序については未解明な部分が多い。 そこで本研究では，マウスへのエタノール継続投与により，がんの誘因となる結腸傷害と炎症反応，特に酸化ストレス誘導への影響について調査検討を行った．また腸内細菌叢への影響についてもモニターすることとした．
SPFレベルの雄マウス（5~6週齢）につき，2週間の適応期間後，コントロール群には毎日１回1 mlの水を経口投与した. エタノール投与群は, 毎日１回1 ml の1.5% (vol/vol) EtOHを経口投与する群 (EtOH 1.5%群；0.5~0.6 g/kg/day)と，毎日１回1 ml の5.0% (vol/vol) EtOHを投与する群 (EtOH 5.0%群；1.7~2.0 g/kg/day)を設けた. これらのマウスを各群8匹ずつ10週間にわたり飼育した．飼育マウスの体重測定および摘便による糞便の回収を定期的に行った.
10週間の投与実験を終えた各群のマウス（18週齢）は解剖後, 肝重量を測定後，肝臓の状態を観察した．摘出臓器は-80℃で冷凍保存した．血中のAlanine aminotransferase (ALT)活性, aspartate aminotransferase (AST) 活性, triglyceride (TG)レベルを測定した. マウス組織の各種の組織化学染色（ヘマトキシリン-エオシン (HE) 染色，トルイジンブルー染色，Foxp3免疫染色，8OHdG染色）を実施中である．

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

飲酒習慣以外の背景因子を可能な限り統一するためにマウスを用いたモデル実験系を構築した．エタノール投与量を二段階に設定したが，結果的に投与量は適切な範囲内に収まり，実験は概ね順調に推移している．

Strategy for Future Research Activity

今後，10週間の投与実験を終えた各群のマウス（18週齢）の糞便や臓器を用いて，予定されている各種の解析を進めていく予定である．

Causes of Carryover

今年度の実験の多くは，既存の試薬や消耗品で対応することができたため．