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2020 Fiscal Year Research-status Report

薬剤耐性菌の出現抑制を目的とした豚レンサ球菌感染症の新規診断・治療法の基盤開発

Research Project

Project/Area Number 18KK0193
Research InstitutionKyoto University

Principal Investigator

中川 一路  京都大学, 医学研究科, 教授 (70294113)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 遠矢 真理  順天堂大学, 医学部, 助教 (20804694)
関崎 勉  東京大学, 大学院農学生命科学研究科(農学部), 教授 (70355163)
相川 知宏  京都大学, 医学研究科, 助教 (70725499)
Project Period (FY) 2018-10-09 – 2022-03-31
Keywordsブタレンサ球菌 / 抗原 / ブタ血清 / 単分子抗体
Outline of Annual Research Achievements

豚レンサ球菌感染症はStreptococcus suisによる人獣共通感染症である。以前からブタにおける家畜感染症として重要であったが、近年アジアを中心としたヒト での感染症例の報告が増加し,大規模なヒト集団感染例の報告などから重要な感染症として世界的に注目されている。しかし、現在行われている抗菌剤の予防的 投与は、耐性菌産生の温床に繋がることから、世界的にも抗菌剤に変わる新たな予防法・治療法について模索が続いている。そこで、本研究では、唾液中・血清中に誘導される抗体に着目し、抗体によって認識される菌側の抗原分子を同定し、さらにS. suisの種々の抗原に対する反応性の高い特異的な人工抗体を選択することを目的としている。本年度は、タイ、ベトナムで収集したブタ血清を用いて、その抗原決定を行った。高病原性の2型莢膜をもつP1-7株と弱毒株であるDAT299, 300株から菌体表層タンパクを分離・精製し、それを抗原として、タイ・ベトナムで収集した血清から精製した抗体を用いて免疫沈降法にて結合するタンパクを分離した。これらの抗原の中で、高病原性株に特異的に反応する抗原のみを選択するため、得られた免疫沈降サンプルをタンパクを質量分析を行った。その結果、S. suisの表層抗原のうち、高病原性株で特異的に検出される抗原3種を決定することができた。これらの抗原を用いて、人工合成scFVライブラリーを用いてスクリーニングを行ったところ、これらに対する単分子抗体を取得することができた。得られた単分子抗体は、ウェスタンブロット・ELISA法を用いた検出系系により、これらの抗原を特異的に認識した。

Current Status of Research Progress
Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

コロナの影響があり、タイ・ベトナムでのサンプリングが滞っている。そのため、本年度は、主にin vitroでの実験を重点に行い、高病原性株に特異的な抗原を決定することができた。

Strategy for Future Research Activity

得られた単分子抗体を遺伝子工学的に完全型抗体の人工構築を目指す。また、得られた抗体を用いたイミュノクロマト法の開発を行う。

Causes of Carryover

遠矢さん分

  • Research Products

    (14 results)

All 2021 2020 Other

All Journal Article (7 results) (of which Peer Reviewed: 7 results,  Open Access: 7 results) Presentation (6 results) (of which Invited: 4 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Intracellular Group A Streptococcus Induces Golgi Fragmentation To Impair Host Defenses through Streptolysin O and NAD-Glycohydrolase2021

    • Author(s)
      Nozawa Takashi、Iibushi Junpei、Toh Hirotaka、Minowa-Nozawa Atsuko、Murase Kazunori、Aikawa Chihiro、Nakagawa Ichiro
    • Journal Title

      mBio

      Volume: 12 Pages: e01974-20

    • DOI

      10.1128/mBio.01974-20

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Autophagy Receptor Tollip Facilitates Bacterial Autophagy by Recruiting Galectin-7 in Response to Group A Streptococcus Infection2020

    • Author(s)
      Lin Ching-Yu、Nozawa Takashi、Minowa-Nozawa Atsuko、Toh Hirotaka、Hikichi Miyako、Iibushi Junpei、Nakagawa Ichiro
    • Journal Title

      Frontiers in Cellular and Infection Microbiology

      Volume: 10 Pages: 583137

    • DOI

      10.3389/fcimb.2020.583137

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Identification of Group A Streptococcus-Containing Autophagosome-Like Vacuoles2020

    • Author(s)
      Nozawa Takashi、Nakagawa Ichiro
    • Journal Title

      Group A Streptococcus

      Volume: 2136 Pages: 223~231

    • DOI

      10.1007/978-1-0716-0467-0_16

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Intracellular Group A Streptococcus induces Golgi fragmentation to impair host defenses through Streptolysin O and NAD-glycohydrolase2020

    • Author(s)
      Nozawa Takashi、Iibushi Junpei、Toh Hirotaka、Minowa-Nozawa Atsuko、Murase Kazunori、Aikawa Chihiro、Nakagawa Ichiro
    • Journal Title

      bioRxiv

      Volume: 0 Pages: 207897

    • DOI

      10.1101/2020.07.16.207894

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Complete Genome Sequences of Streptococcus pyogenes Serotype M3, M28, and M89 Strains Isolated from Human Patients in Japan, 1994 to 20092020

    • Author(s)
      Murase Kazunori、Nozawa Takashi、Aikawa Chihiro、Nagao Miki、Ikebe Tadayoshi、Yoshida Akemi、Kikuchi Taisei、Nakagawa Ichiro
    • Journal Title

      Microbiology Resource Announcements

      Volume: 9 Pages: e01047-20

    • DOI

      10.1128/MRA.01047-20

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Complete Genome Sequences of Two Streptococcus suis Strains Isolated from Asymptomatic Pigs2020

    • Author(s)
      Minowa-Nozawa Atsuko、Nozawa Takashi、Takamatsu Daisuke、Yoshida Akemi、Murase Kazunori、Kikuchi Taisei、Ishida-Kuroki Kasumi、Nitta Yoshihiro、Sekizaki Tsutomu、Nakagawa Ichiro
    • Journal Title

      Microbiology Resource Announcements

      Volume: 9 Pages: e01142-20

    • DOI

      10.1128/MRA.01142-20

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Group A Streptococcus establishes pharynx infection by degrading the deoxyribonucleic acid of neutrophil extracellular traps2020

    • Author(s)
      Tanaka Mototsugu、Kinoshita-Daitoku Ryo、Kiga Kotaro、Sanada Takahito、Zhu Bo、Okano Tokuju、Aikawa Chihiro、Iida Tamako、Ogura Yoshitoshi、Hayashi Tetsuya、Okubo Koshu、Kurosawa Miho、Hirahashi Junichi、Suzuki Toshihiko、Nakagawa Ichiro、Nangaku Masaomi、Mimuro Hitomi
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 10 Pages: 3251

    • DOI

      10.1038/s41598-020-60306-w

    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] TBC1D9を介したカルシウムシグナリングはTBK1依存性ゼノファジーを制御する2020

    • Author(s)
      中川一路
    • Organizer
      第32回日本生体防御学会
    • Invited
  • [Presentation] 化膿連鎖球菌由来金属獲得蛋白質 MtsA に対する機能阻害剤の探索2020

    • Author(s)
      中木戸 誠,竹内 美結,長門石 曉,相川 知宏,中川 一路,津本 浩平
    • Organizer
      第94回日本細菌学会総会
    • Invited
  • [Presentation] A 群レンサ球菌の増殖に必要な鉄獲得機構に対する阻害剤の探索2020

    • Author(s)
      相川 知宏,長門石 曉,中木戸 誠,妹尾 暁暢,星野 将人,野澤 孝志,村瀬 一典,津本 浩平,中川 一路
    • Organizer
      第94回日本細菌学会総会
    • Invited
  • [Presentation] ESCRT 機構による A 群レンサ球菌感染制御2020

    • Author(s)
      野澤 孝志,中川 一路
    • Organizer
      第94回日本細菌学会総会
    • Invited
  • [Presentation] GBP1はTBK1 のリン酸化を介してA 群レンサ球菌に対する選択的オートファジーを制御する2020

    • Author(s)
      曵地 京,野澤 孝志,中川 一路
    • Organizer
      第94回日本細菌学会総会
  • [Presentation] オートファジー関連因子ATG9はA 群レンサ球菌の細胞内への侵入を制御する2020

    • Author(s)
      飯伏 純平,藤 博貴,野澤 孝志,中川 一路
    • Organizer
      第94回日本細菌学会総会
  • [Remarks] 京都大学大学院医学研究科微生物感染症学分野

    • URL

      http://www.bac.med.kyoto-u.ac.jp

URL: 

Published: 2021-12-27  

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