2020 Fiscal Year Research-status Report
AAVベクターとsmall RNAを用いた神経疾患の遺伝子治療開発研究
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18KK0465
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| Research Institution | Jichi Medical University |
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Principal Investigator |
小島 華林 自治医科大学, 医学部, 講師 (00468331)
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| Project Period (FY) |
2019 – 2021
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| Keywords | 遺伝子治療 / AAVベクター / 小児神経 / miRNA / 大脳皮質オルガノイド |
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| Outline of Annual Research Achievements |
AAVベクターを用いた遺伝性神経疾患に対する遺伝子治療法開発は世界的に進展しているが、全ての神経細胞への導入および発現量の調節ができない点が課題で ある。申請者らは小児神経難病AADC欠損症に対し、正常AADC遺伝子搭載AAV2型ベクターを被殻に注入する遺伝子治療を8名に施行し、全例で運動機能の改善を得た(Kojima, et al. Brain 2019)。本研究では、海外共同研究者が得意とするsmall RNA関連技術を用い以下を実施する。1：AADC欠損症や他の小児神経疾患をモデルに、small RNA等を用い、AAVで導入した遺伝子の発現調節法の開発。2：小児中枢神経疾患におけ るmicroRNAの病因への関与の解析と遺伝子治療による介入研究。 国内外の共同研究者と連携し、多くの小児神経疾患へのAAVとmicroRNA等を用いた遺伝子治療法開発の端緒とする。
miRNA302は胎児期の神経幹細胞の分化や神経管閉鎖に重要な役割を果たす事が報告されている。今年度は、miRNA302KOマウス胎児脳を用い、神経管閉鎖不全に糖代謝が及ぼす影響を解析し報告した（Keuls,Kojima, et al.Int J mol sci 2020).
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
小児中枢神経疾患におけるmicroRNAの病因への関与の解析と遺伝子治療による介入研究として、エレクトロポレーション技術を用いて子宮内胎児マウス脳へ疾患 関連遺伝子を導入し、解析を行っている。先天性小児神経疾患Xの治療用AAVベクターベクター中である。複数疾患の患者iPS細胞を樹立した。
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| Strategy for Future Research Activity |
先天性小児神経疾患Xの治療用AAVベクターの効果を培養細胞及びマウスを用いて解析する。疾患X以外に他２疾患の患者iPS細胞を樹立したので、今後脳オルガノイド組織を作成し、AAVベクターによる発現寮の 違い、神経発達への影響を解析する。疾患XおよびAADC欠損症のベクター発現量調整する新規方法をマウス、オルガノイド組織を用いて、発現量調整が可能かを 確認する。
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