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2008 Fiscal Year Annual Research Report

酵母ミトコンドリアタンパク質配送における行き先シグナル解読機構の解明

Research Project

Project/Area Number 19036007
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

遠藤 斗志也  Nagoya University, 大学院・理学研究科, 教授 (70152014)

Keywordsミトコンドリア / 酵母 / 行き先シグナル / NMR / 膜透過
Research Abstract

酵母細胞内にamberサプレッサーtRNAとこれに非天然アミノ酸BPA(p-benzoyl-L-phenylalanine)をチャージできるアミノアシルtRNA合成酵素(BpaRS)を発現させると, 目的タンパク質内のamberコドンで指定した位置にBPAを組み込むことができる。この細胞または細胞抽出液に紫外光を照射するとBPAと近傍のタンパク質間に架橋が形成されるので, 架橋産物の相手を同定すれば, 目的タンパク質についてどの位置でどんなタンパク質と相互作用しているかをマッピングすることができる。
この手法を酵母ミトコンドリア外膜のトランスロケータTOM40複合体構成因子Tom22に適用した。Tom22は一回膜貫通型タンパク質で, N端ドメインをサイトゾルに, C端ドメインを膜間部側に持つ。Tom22分子全体に5残基毎にBPAを導入し, 光架橋を行い, TOM40複合体構成因子および内膜のトランスロケータ構成因子の抗体を用いて, 架橋相手を同定した。Tom22のサイトゾルドメインはTOM40複合体の二種類の受容体, Tom70とTom20と相互作用していた。詳細なマッピングから, Tom22はTom20が認識する前駆体の行き先シグナルを別な角度からサンドイッチする形で認識している可能性が示唆された。Tom22の膜貫通ドメインはTOM40複合体の膜透過チャネルTom40と相互作用し, 複合体を安定に保っているらしいこと, 一分子のTom22は二分子のTom40と相互作用していることが分かった。さらに, Tom22の膜間部ドメインは内膜のトランスロケータTIM23複合体の受容体サブユニットTim50と相互作用していることが分かった。

  • Research Products

    (19 results)

All 2009 2008

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (15 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Structural stabilities of different regions of the titin I 27 domain contribute differently to unfolding upon mitochondrial protein import2009

    • Author(s)
      T. Oguro, K. Yagawa, T. Momose, T. Sato, K. Yamano, and T. Endo
    • Journal Title

      J. Mol. Biol. 385

      Pages: 811-819

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Tim 23-Tim 50 pair coordinates functions of translocators and motorproteins in mitochondrial protein import2009

    • Author(s)
      Y. Tamura, Y. Harada, T. Shiota, K. Yamano, K. Watanabe, M. Yokota, H. Yamamoto, H. Sesaki, and T. Endo
    • Journal Title

      J. Cell Biol. 184

      Pages: 129-141

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Step size analyses of the mitochondrial Hsp 70 import motor reveal the Brownian ratchet in operation2008

    • Author(s)
      K. Yamano, M. Kuroyanagi-Hasegawa, M. Esaki, M. Yokota, and T. Endo
    • Journal Title

      J. Biol. Chem. 283

      Pages: 27325-27332

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Structural basis of molecular recognition in mitochondrial protein import2009

    • Author(s)
      Toshiya Endo
    • Organizer
      International Symposium on Molecular Soft Interactions in Biological Systems
    • Place of Presentation
      Osaka
    • Year and Date
      20090122-23
  • [Presentation] Analysis of function of Pam 18, the subunit of the mitochondrialmembrane translocator2009

    • Author(s)
      Mayumi Matunaga, Koji Yamano, and Toshiya Endo
    • Organizer
      1 st G-COE International Symposium on Elucidation and Design of Materials and Molecular Function
    • Place of Presentation
      Nagoya
    • Year and Date
      20090113-14
  • [Presentation] ミトコンドリアジスルフィド結合導入タンパク質Tim40の構造解析2009

    • Author(s)
      河野慎, 百瀬隆喜, 寺尾佳代子, 山野晃史, 渡邉信久, 遠藤斗志也
    • Organizer
      生物物理学会中部支部講演会
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      2009-03-31
  • [Presentation] Biogenesis of beta-barrel proteins in the mitochondrial outer membrane2008

    • Author(s)
      Koji Yamano, Sachiko Tanaka, and Toshiya Endo
    • Organizer
      シンポジウム「タンパク質機能発現システム-シャペロンからトランスロケータまで」BMB2008(第31回日本分子生物学会年会,第81回日本生化学会合同大会)
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20081209-12
  • [Presentation] in vivo部位特異的光架橋法によるミトコンドリア外膜膜透過装置構成因子Tom22の機能解析2008

    • Author(s)
      塩田拓也, 間渕英, 山野晃史, 田村康, 遠藤斗志也
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会,第81回日本生化学会合同大会)
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20081209-12
  • [Presentation] ミトコンドリア行きシグナルとその受容体Tom20の同時改変2008

    • Author(s)
      水谷和揮, 吉久徹, 遠藤斗志也
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会,第81回日本生化学会合同大会)
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20081209-12
  • [Presentation] ミトコンドリア膜透過装置維持に働くTam41のマルチコピーサプレッサータンパク質Sta65の機能解析2008

    • Author(s)
      原田佳宗, 遠藤斗志也
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会,第81回日本生化学会合同大会)
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20081209-12
  • [Presentation] ミトコンドリア移行シグナル認識におけるTom70の役割2008

    • Author(s)
      福井健二, 高橋央, 北村真吾, 山野晃史, 横田美穂子, 遠藤斗志也
    • Organizer
      BMB2008(第31回日本分子生物学会年会,第81回日本生化学会合同大会)
    • Place of Presentation
      神戸
    • Year and Date
      20081209-12
  • [Presentation] NMRによるtitin I27変異体の力学的安定化機構の解明2008

    • Author(s)
      Keisuke Yagawa, Takaomi Oguro, Masahiro Maeda, Takehiro Sato, Takaki Momose, and Toshiya Endo
    • Organizer
      第46回生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      20081203-05
  • [Presentation] NMRを用いたミトコンドリアタンパク質輸送因子Tim21と呼吸鎖構成因子Qcr6との相互作用2008

    • Author(s)
      Takashi Yashiro, Takashi Yokoyama, Keiko Morishita, Masahiro Maeda, Takaki Momose, Kaori Wakamatsu, and Toshiya Endo
    • Organizer
      第46回生物物理学会年会
    • Place of Presentation
      福岡
    • Year and Date
      20081203-05
  • [Presentation] Coordinated functions of mitochondrial translocator proteins for protein translocation across and into the membranes2008

    • Author(s)
      Toshiya Endo
    • Organizer
      EMBO Conference on Control, Co-ordination and Regulation of Protein Targeting and Translocation
    • Place of Presentation
      Saint Maxime, France
    • Year and Date
      20081025-29
  • [Presentation] Mdm 10-Tom 7 pair functions in assembly of Tom 40, a majorbeta-barrel protein in the mitochondrial outer membrane2008

    • Author(s)
      Koji Yamano, Sachiko Tanaka, and Toshiya Endo
    • Organizer
      EMBO Conference on Control, Co-ordination and Regulation of Protein Targeting and Translocation
    • Place of Presentation
      Saint Maxime, France
    • Year and Date
      20081025-29
  • [Presentation] Control and alteration of protein traffic in the cell2008

    • Author(s)
      Toshiya Endo
    • Organizer
      The Uehara Memorial Foundaton Symposium "System Biology : The Challenge of Complexity"
    • Place of Presentation
      Tokyo
    • Year and Date
      20080630-0702
  • [Presentation] In vivo部位特異的光架橋法によるミトコンドリア外膜膜透過装置構成因子Tom22のサブユニット間相互作用の解析2008

    • Author(s)
      塩田拓也, 間渕英,山野晃史, P. G. Schultz, 遠藤斗志也
    • Organizer
      第72回生化学会中部支部例会
    • Place of Presentation
      岐阜
    • Year and Date
      2008-05-24
  • [Presentation] NMRによるβサンドイッチ型タンパク質titin I27変異体の力学的安定化機構の解明2008

    • Author(s)
      矢川啓介, 小黒隆臣, 前田正洋, 佐藤健大, 百瀬隆喜, 遠藤斗志也
    • Organizer
      第72回生化学会中部支部例会
    • Place of Presentation
      岐阜
    • Year and Date
      2008-05-24
  • [Book] Systems Biology-The Challenge of Complexity (eds. S. Nakanishi, R. Kageyama, and D. Watanabe)2009

    • Author(s)
      T. Endo
    • Total Pages
      129-134
    • Publisher
      Control and alteration of protein traffic in the cell

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Published: 2010-06-11   Modified: 2016-04-21  

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