時計タンパク質の核移行と核におけるリズム発振機構の解析

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19038010
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 石浦 正寛 Nagoya University, 遺伝子実験施設, 教授 (20132730)
• Keywords: 生物時計 / クラモドモナス / 時計遺伝子 / ROC遺伝子 / 時計タンパク質 / 蛍光タンパク質 / 細胞内局在

Research Abstract

単細胞性緑藻クラミドモナスにおいて、生物発光リズム系を開発し、その系を利用して、30個の時計遺伝子と時計関連遺伝子の同定に成功した(Matuo et al., 2008, Gen. Dev.)。これらの遺伝子の中で転写制御因子の遺伝子と思われる4つの時計遺伝子ROC15、ROC40、ROC55、ROC75に関して、蛍光タンパク質と融合した時計タンパク質を発現するコンストラクトを作製し、それぞれ対応するリズム変異体に遺伝子移入し、得られた形質転換体から表現型が野生型に戻っているものを選択し、融合タンパク質の細胞内局在とその時間変化を蛍光顕微鏡観察で解析する。また、蛍光タンパク質タグを利用して時計タンパク質複合体を分離して解析する。今年度は形質転換体の作製まで進めることができた。

Research Products

• [Journal Article] Identification and characterization of the Na^+/H^+ antiporter Nhas 3 from the thylakoid membrane of Synechocystis sp. PCC 6803 (2009)
  • Author(s): Tsunekawa K, Shijuku T, Hayashimoto M, Kojima Y, Onai K, Morishita M, Ishiura M, Kuroda T, Nakamura T, Kobayashi H, Sato M, Toyooka K, Matsuoka K, Omata T, Uozumi N.
  • Journal Title: J Biol Chem. 284(In press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Functionally important structural elements of the cyanobacterial clock-related protein Pex (2009)
  • Author(s): Kurosawa S, Murakami R, Onai K, Morishita M, Hasegawa D, Iwase R, Uzumaki T, Hayashi F, Kitajima-Ihara T, Sakata S, Murakami M, Kouyama T. Ishiura M.
  • Journal Title: Genes Cells 14 Pages: 1-16
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] ATPase activity and its temperature compensation of the cyanobacterial clock protein KaiC (2008)
  • Author(s): Murakami R, Miyake A, Iwase R, Hayashi F. Uzumaki T. Ishiura M.
  • Journal Title: Genes Cells 13 Pages: 387-395
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A systematic forward genetic analysis reveals components of the Chlamydomonas cicradian system (2008)
  • Author(s): Matsuo T, Okamoto K, Onai K, Niwa Y, Shimogawara K., Ishiura M.
  • Journal Title: Gene Dev. 22 Pages: 918-930
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] 真核生物における生物時計の新しい実験系 : クラミドモナス (2008)
  • Author(s): 松尾拓哉、石浦正寛
  • Journal Title: 蛋白質核酸酵素 53 Pages: 1873-1880
• [Presentation] Systematic identification of circadian clock components in the Chlamydomonas reinhardtii. Invited talk (2008)
  • Author(s): Matsuo T, Okamoto K, Onai K, Niwa Y, Shimogawara K, Ishiura M.
  • Organizer: The 13^<th> international Chlamydomonas conference
  • Place of Presentation: Hyeres-les-Palmiers, France
  • Year and Date: 20080527-0601
• [Remarks]
  • URL: http://www.gene.nagoya-u.acjp/~ishiura-g/index.html
• [Patent(Industrial Property Rights)] 制御プログラム及び培養装置 (2008)
  • Inventor(s): 石浦正寛、岡本和久
  • Industrial Property Rights Holder: 名古屋大学総長
  • Industrial Property Number: 特許第4129531号
  • Acquisition Date: 2008-05-30
• [Patent(Industrial Property Rights)] Apparatus for monitoring bioluminescence of biological samples (2008)
  • Inventor(s): Ishiura M, Okamoto K, Onai K, Furusawa T
  • Industrial Property Rights Holder: 名古屋大学総長
  • Industrial Property Number: US特許番号 : US7,407,797 B2
  • Acquisition Date: 2008-05-30
  • Overseas