機能性インプラントのためのセメント質誘導ペプチド創製

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19209061
• Research Institution: Tokyo Dental College
• Principal Investigator: 井上 孝 Tokyo Dental College, 歯学部, 教授 (20125008)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 吉成 正雄 東京歯科大学, 歯学部, 准教授 (10085839) ; 松坂 賢一 東京歯科大学, 歯学部, 准教授 (70266568) ; 芝 清隆 (財)癌研究会, 癌研究所・蛋白創製研究部, 部長 (40196415)
• Keywords: インプラント / チタン / 人工ペプチド / チタン結合ペプチド / セメント質 / RGDモチーフ / 融合ペプチド / 細胞接着

Research Abstract

本研究の目的が、セメント質誘導性機能性ペプチドの開発であるが、平成19年度には、共同研究者の芝らが開発した研究により、細胞のインテグリンなどと結合するRGDモチーフのタンパク質とチタンに結合するタンパク(TBP-1)を応用し、チタン上に両モチーフを含む合成タンパク質をMolclaftにより作製し、以下の点について検討した。まず、人工タンパク質の細胞接着アッセイとして、RGDとタンTBPを含む人工タンパクをチタンへ固定した。その後、人工タンパク質吸着量を水晶発振子マイクロバランス(QCM)法にて測定し、接着していることを確認した。さらに、X線光電子分光分析で表面分析を行い、人工タンパク質の結合状態を検討した。次に、人工タンパク固定チタン上での細胞培養試験をおこなった。まず、マウス骨芽細胞様細胞であるMC3T3細胞を人工タンパク固定表面上で培養し、通法による細胞増殖能の測定をおこなったところ対照群に比べ有意に細胞の増殖が認められた。さらに、細胞の広がりをアクチンおよびビンキュリンタンパクを用いて、備品にて購入した共焦点レーザー顕微鏡による細胞形態観察をおこなったところ、人工タンパク質を固定したもので、より細胞の接着と伸展が見られた。さらに、人工タンパク上での細胞分化への検討について、骨またはセメント芽細胞への分化の検索(Al-p,Bone sialoprotein,Dentin sialoprotein,Cementum sialoprotein,Osteopontin,Osteocalcin,Collagen)RT-PCR法を用いてmRNAレベルと、蛋白解析をし、いずれも対照群に比べ有意に早い分化を示すことが明らかとなった。以上について、International Association for Dental Research,2007,New Olinsおよび第5回日本再生歯科医学会総会にて発表した。

Research Products

• [Journal Article] Profiling of differentially expressed genes in porcine epithelial cells derived from periodontal ligament and gingiva by DNA microarray (2008)
  • Author(s): Y Kurashige, M Saitoh, M Nishimura, D Noro, T Kaku, S Igarashi, T Takuma, T Arakawa, T Inoue, Y Abiko
  • Journal Title: Archives of Oral Biology (in Press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Controlled release of simvastatin acid using cyclodextrin inclusion system (2007)
  • Author(s): Yoshinari, M., Matsuzaka, K., Hashimoto, S., Ishihara, K., Inoue, T., Oda, Y., Ide, T. and Tanaka, T.
  • Journal Title: Dental Materials Journal 26 Pages: 451-456
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Adhesion of mouse fibroblasts on hexamethyldisiloxane surfaces with wide range of wettability (2007)
  • Author(s): Wei, J., Yoshinari, M., Takemoto, S., Hattori, M., Kawada, E., Liu, B.Oda, Y.
  • Journal Title: Journal of Biomedical Materials Research 81B Pages: 66-75
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cellular responses of rat periodontal ligament cells under hypoxia and re-oxygenation conditions in vitro (2007)
  • Author(s): Amemiya H, Matsuzaka K, Kokubu E, Ohta S, Inoue T
  • Journal Title: Journal of Periodontal Research (On line) Pages: Doi:10.1111/j.16000-0765.2007.01032.x
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Characteristics of newly formed bone during guided bone regene ration; Analysis of Cbfa-1,osteocalcin,and VEGF expression (2007)
  • Author(s): Tanaka S, Matsuzaka K, Sato D, Inoue T.
  • Journal Title: Journal Oral Implantology 33 Pages: 321-326
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Gene expression of MC3T3-E1 cells on fibronectin-immobihzed titanium using tresyl chloride activation technique (2007)
  • Author(s): Pugdee, K., Shibata, Y., Yamamichi, N., Tsutsumi, H., Yoshinari, M., Abiko, Y. and Hayakawa T.
  • Journal Title: Dental Materials Journal 26 Pages: 647-655
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Draining orocutaneous fistula associated with a failing subperios teal implant:report of a case. (2007)
  • Author(s): Markiewicz, M.R., Nishiyama, K., Yago, K, Okada, M., Asanami, S., Yoshinari, M., Hirayama, M., Margarone, J.E. and Chuang, S.K.
  • Journal Title: Journal of Oral Implantology 33 Pages: 347-352
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Effect on the amount of bone-implant contact when splinting immediate-loaded dental implants (2007)
  • Author(s): Kenichi Matsuzaka, Yasushi Nakajima, Yoshikazu Soejima, Hirofumi Kido, Masaro Matsuura, Takashi Inoue
  • Journal Title: Implant Dentistry 16 Pages: 309-316
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Increased expression of β-defensin-2 and -3 during the development of autoimmune sialoadenitis in MRL/Ipr mice (2007)
  • Author(s): M.Saitoh, Y Kurashige, M yamazaki, M Nishimura, S Nakamura, D Noro, M Takeshima, T Arakawa, T Takuma, S Igarashi, T Kaku, T Inoue, Y Abiko
  • Journal Title: Med Mol Morphol (On line) Pages: DOI 10.1007/s00795-007-0375-6
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] The effects of ion beam-assisted deposition of hydroxyapatite on the osseointegration of endosseous implant surface (2007)
  • Author(s): M.K.Kim, J.Y.Choi, U.W.Jung, I.S.Lee, T Inoue, S.H.Choi
  • Journal Title: Key Engineering Materials 330-332 Pages: 597-600
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Healing of surgically created circumferential gap around non-submerged type implants in dogs:a histomorphometric study (2007)
  • Author(s): U.W.Jung, C.S.Kim, S.H.Choi, K.S.Cho, T.Inoue, D.K Kime
  • Journal Title: Clin.Oral Impl.Res 18 Pages: 171-178
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Reduction of streptococcus mutans adherence and dentin biofilm formation by surface treatment with phosphorylated polyethylene glycol (2007)
  • Author(s): A.Shimotoyodome, T Koudate, H Kobayashi, J Nakamura, I Tbkimitsu, T Hase T.Inoue, T.Matsukubo Y.Takaesu
  • Journal Title: Antimicrobial agents and chemotherapy 51 Pages: 3634-3641
  • Peer Reviewed
• [Book] 齲蝕学、チェアーサイドの予防と回復のプログラム (2008)
  • Author(s): 井上 孝(共著)
  • Total Pages: 256
  • Publisher: 永末書店
• [Book] 新編歯科理工学 第4版 金属材料, 歯科用陶材, メタル・セラミックス, インプラント用材料 (2007)
  • Author(s): 吉成 正雄(共著)
  • Total Pages: 806
  • Publisher: 学建書院