海綿由来の抗菌活性物質の探索および感染症治療薬リード化合物の創製

2008 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19310042
• Research Institution: Daiichi University, College of Pharmaceutical Sciences
• Principal Investigator: 原口 浩一 Daiichi University, College of Pharmaceutical Sciences, 薬学部, 教授 (00258500)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 加藤 善久 徳島文理大学, 香川薬学部, 准教授 (90161132) ; 松原 大 第一薬科大学, 薬学部, 准教授 (60368975)
• Keywords: 抗菌活性 / 海綿動物 / リード化合物 / ハロゲン化合物 / LC / MS / MS / 母乳

Research Abstract

1、抗菌活性を有する臭素系ハロゲン化合物のうち、hydroxy-およびmethoxy-tetraBDE, dihydroxy-およびdimethoxy-tetrabromobiphenyl(dimethoxy-tetraBB)についてAPCIイオン化LC/MS/MSによる定量法を確立した。本方法を用いて、パラオ産の海綿動物(Dysidae spなど)より、2'-OH-BDE68, 6-OH-BDE47および2,2'-diOH-BB80を検出した。沖縄(石垣島)のイタチザメ肝臓中には、これらのOH体が最大で0.8 ng/g、オオメジロザメの肝臓中には6.2〜8.4 ng/g含まれていた。一方、methoxy体はイタチザメ、カズハゴンドウおよびシャチの脂肪組織にはPBDEより高濃度200-450 ng/gで残留していた。
2、海綿で産生するハロゲン化合物を代謝し、抗菌活性を有する細菌を探索する目的で、パラオ産海綿(12種類)に生存する細菌のスクリーニングを行った。Marine agar培地で培養したコロニーからDNA抽出、PCR法により目的とする配列を増幅し、精製したDNAのダイレクトシーケンシングから16S rRNA解析による細菌を分類し、bromoperoxidaseをコードする配列の存在を検討した。コロニーからganmma proteobacteriumなどが認められた。本研究手法はOH-PBDEなど臭素系ハロゲン化合物の産生菌の探索の手がかりとなり、海綿種を増やして探索中である。
3、日本人母乳中の臭素系ハロゲン化合物の定性、定量分析を行った。京都大学生体試料バンクより得られた日本人母乳60試料すべてから、残留PBDEsと同レベルのmethoxy-BDEが2種、dimethoxy-tetraBBが1種、halogenated bipyrrolesが2種検出された。それらの濃度はPBDE異性体と同レベルで残留し、それらは海産物の食事に由来すると考えられる。

Research Products

• [Journal Article] Halogenated bipyrroles and metoxylated tetrabromodiphenyl ethers in tiger shark (Galeocerdo cuvier) from southern coast of Japan (2009)
  • Author(s): K. Haraguchi
  • Journal Title: Environmental Science and Technology 43 Pages: 2288-2294
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Levels and regional trends of persistent organochlorines and polybrominated diphenyl ethers in Asian breast milk demonstrate POPs signatures unique to individual countries (2009)
  • Author(s): K. Haraguchi
  • Journal Title: Environment International (In press)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Negative APCI-LC/MS/MS method for determination of natural persistent halogenated products in marine biota (2008)
  • Author(s): K. Haraguchi
  • Journal Title: Analytical Chemistry 80 Pages: 9748-9755
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 海綿に生息する細菌の16S rRNA遺伝子解析による系統分離 (2009)
  • Author(s): 松原大
  • Organizer: 日本薬学会第129年会
  • Place of Presentation: 京都
  • Year and Date: 2009-03-26
• [Presentation] APCI-LC/MS/MSによる天然ハロゲン化合物の定量 : 海洋哺乳動物における蓄積特性 (2008)
  • Author(s): 加藤善久
  • Organizer: 環境ホルモン学会(第11回研究発表会)
  • Place of Presentation: 東京
  • Year and Date: 2008-12-14
• [Presentation] 海洋哺乳動物におけるPCB代謝物 : 鯨類の肝臓中にみられるmethylsulfoneおよびdihydroxy体の残留特性 (2008)
  • Author(s): 原口浩一
  • Organizer: 衛生薬学・環境トキシコロジー(フォーラム2008)
  • Place of Presentation: 熊本
  • Year and Date: 2008-10-17