2009 Fiscal Year Annual Research Report
低温ショックドメインタンパク質による植物の耐凍性制御の分子機構解明
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19380063
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| Research Institution | National Agricultural Research Organization |
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Principal Investigator |
今井 亮三 National Agricultural Research Organization, 北海道農業研究センター・低温耐性研究チーム, 主任研究員 (90291913)
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| Keywords | 低温ショック / シロイヌナズナ / RNA結合タンパク質 / ポリA結合タンパク質 |
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| Research Abstract |
植物細胞内でのAtCSP3機能複合体を解析するため、酵母ツーハイブリッド法を用いてAtCSP3相互作用タンパク質をスクリーニングした。AtCSP3と相互作用するタンパク質として核局在型ポリA結合タンパク質(AtPABN1-AtPABN3)、機能未知な核小体タンパク質、それにAtCSP1タンパク質を含む12個のタンパク質を同定した。このうち、AtPABNsは核局在型のポリA結合タンパク質と予想されるが、植物における機能は不明である。AtPABNsはRRMドメイン(RNAとの結合に必要)およびcoiled-coilドメイン(タンパク質との結合に必要)より構成される。次に、AtCSP3とAtPABNsの植物細胞における相互作用をBiFC(二分子蛍光相補性試験)法により調べた。BiFC法では2つのタンパク質が相互作用するとその複合体の存在部位においてYFP蛍光が観察される。AtCSP3とAtPABN1のBiFC試験では、核全体においてYFP蛍光が観察されたことから、両者が相互作用することが確認された。一方、AtPABN2およびAtPABN3の場合は核内の核スペックル(核内におけるドット状の構造体で、mRNAの成熟に関与するものと考えられている)と予想される領域で蛍光が観察されたことから、核スペックルにおける相互作用が確認された。これらの結果から、AtCSP3は核内において、種々のタンパク質と相互作用しており、.多彩な機能を果たしていることが明らかとなった。
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