2008 Fiscal Year Annual Research Report
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19390106
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| Research Institution | Tokyo Women's Medical University |
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Principal Investigator |
古川 徹 Tokyo Women's Medical University, 国際統合医科学インスティテュート, 教授 (30282122)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高垣 洋太郎 東京女子医科大学, 国際統合医科学インスティテュート, 教授 (50281324)
眞崎 知生 東京女子医科大学, 国際統合医科学インスティテュート, 教授 (60009991)
山本 雅一 東京女子医科大学, 医学部, 教授 (60220498)
羽鳥 隆 東京女子医科大学, 医学部, 講師 (50208550)
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| Keywords | 膵臓がん / MAPK / RNA干渉 / 分子診療 / アポトーシス / 増殖抑制 / 細胞回転 / 網羅的解析 |
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| Research Abstract |
I.候補分子診療標的の発現解析(古川、眞崎、山本、羽鳥):前年度までに同定した候補分子診療標的の膵臓がん組織内発現の解析を行った。膵臓がん組織内発現解析では前がん病変と浸潤がん病変部分で比較解析を行い,発現解析には定量PCR法による転写物発現解析、特異的抗体による蛋白発現解析を行った。分子により発現様式は異なっていたが幾つかで膵臓がん組織中での発現亢進が認められた。新規分子についてcDNAクローニング,特異抗体の新規作成を行い、特異性を検:討した。
II.候補分子診療標的の機能解析(古川、高垣):候補分子診療標的の機能を発現ベクターを用いた強制発現,RNA干渉による発現抑制をベースにがん細胞のin vitroにおける生存、増殖の変化,in vivoでの腫瘍形成等の悪性形質の変化を細胞回転、細胞内挙動,蛋白相互作用、遺伝子・蛋白発現プロファイルの変化の観点から解析した。In vitroでは同定標的分子の恒常的発現抑制によりがん細胞の生存が有意に押さえられた。細胞回転の検討でGO/G1停止あるいはG2/M停止を来していた。標的分子の恒常的発現抑制クローンをヌードマウス皮下に移植し、造腫瘍性を解析したところ,幾つかのクローンで造腫瘍性が有意に押さえられた。幾つかの分子については干渉RNAの誘導発現系を用いて解析中である。ある標的分子の蛍光標識蛋白を発現させ,細胞内局在を確認したところ,核内に点状に分布していた。同分子の蛋白相互作用を幾つかの候補について解析中である。がん細胞におけるMAPK経路抑制による蛋白発現プロファイルの変化を2D-DIGE法により解析し,発現が有意に変化する蛋白を幾つか同定した。DUSP6について発現制御機構を解析した。以上より、同定した標的分子についてはがん細胞の増殖,生存に重要な役割を果たしていることが示された。
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