消化器癌早期診断のためのエピジェネティックバイオマーカの開発

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 19390351
• Research Institution: Okayama University
• Principal Investigator: 松原 長秀 Okayama University, 医学部・歯学部附属病院, 助教 (70314672)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 田中 紀章 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (10127566) ; 清水 憲二 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (10037286) ; 永坂 岳司 岡山大学, 医学部, 客員研究員 (30452569)
• Keywords: 大腸癌 / スクリーニング / DNAメチル化 / 消化器癌 / 早期診断 / epigenetic alteration

Research Abstract

DNAプロモータのメチル化をバイオマーカーとする画期的な診断法の確立により、そうK診断のみならず、腫瘍の性格診断、治療効果の判定等への応用をすすめ、安価で実用的で最も効果的な診断法としての意義を確立することを目的とした。現在研究期間として1年経過した所である。検出方法としてはmethylation specific PCR (MSP)を改良し、internal controlをもうけたMSSP (methylation specific single PCR)法を用いる方法で0.01%までの検出感度を上げることができ、(PCT特許出願済み)ていた。しかし、擬陽性が出現すると検査自体の特異度が落ちる心配があるため、これを改良したHiSA (high sensitivity assay)法を完成させ、特異度を上げることができた。これは国内特許を申請した。便中のDNAプロモータのマーカー部位も、様々な検討を行った。同じプロモータ状の複数のメチル化部位を同時に検討することにより、より、癌形成過程の生物学的側面を反映させることが可能となった。つまり、前癌状態としての腺腫、早期大腸癌、進行大腸癌のどの段階にあるか等質的診断も加味できる可能性がでてきた。また、大腸にできるポリープ、癌以外の病態においてどのような便中のメチル化の変化が生じるか等の詳細な検討も加わり、よりこの検査法の適正さが検討できた。一方、胃癌に対してもこの検査法で検出可能であることが証明されたことも大きな成果であった。さらに、膵癌等に関しての検討を始めている。

Research Products

• [Journal Article] Oesophageal squamous cell cancer may develop within a back ground of accumulating DNA methylation in normal and dys plastic mucosa. (2007)
  • Author(s): Ishii, T., Murakami, J., Notohara, K., Cullings, H.M., Sasamoto, H., Kambara, T., Shirakawa, Y., Naomoto, Y., Ouchida, M., Shimizu, K., Tanaka, N., Jass, J. R., Matsubara, N.
  • Journal Title: Gut 56, Pages: 13-19
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] No duplicate KRAS mutation is identified on the same allele of gastric or colorectal cancer cells with multiple KRAS mutations. (2007)
  • Author(s): Kimura, K., Nagasaka, T., Sasamoto, H., Notohara, K., Takeda, M., Komnami, K., Ishii, T., Tanaka, N., Matsubara, N.
  • Journal Title: J. Int. Med. Res. 35 Pages: 450-457
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Depletion of O6-methylguanine-DNA methyltransferase by O6-benzylguanine enhances 5-FU cytotoxicity in colon and oralcancer cell lines. (2007)
  • Author(s): Murakami J, Lee YJ, Kokeguchi S, Tsujigiwa H, Asaumi J, Nagatsuka H, Fukui K, Kuroda M, Tanaka N, Matsubara N.
  • Journal Title: Onclo. Rep. 17(6): Pages: 1461-1467
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Microsatellite instability and clinicopathological features in esophageal squamous cell cancer. (2007) (2007)
  • Author(s): Matsumoto, Y., Nagasaka, T., Kambara, T., Hoshizima N., Murakami, J., Sasamo to, H., Hosokawa, M., Naomoto, Y., Isozaki, H., Shimizu, K., Tanaka, N., Matsubara, N.
  • Journal Title: Oncol. Rep. 18, Pages: 1123-1127
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Epigenetic and Genetic Alterations in Netrin-1 Receptors UNC5C and DCC in Human Colon Cancer.(2007) (2007)
  • Author(s): Sung Kwan Shin, Takeshi Nagasaka, Barbara H. Jung, Nagahide Matsubara, Won Ho Kim, John M. Carethers, C. Richard Boland, and Aiay Goel
  • Journal Title: Gastroenterology 133: Pages: 1849-1857
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Methylation pattern of the O6-methylguanine-DNA methyltransferase gene in colon during progressive colorectal tumorigenesis (2007) (2007)
  • Author(s): Takeshi Nagasaka, Ajay Goel, Kenji Notohara, Takaomi Takahata, Hiromi Sasamoto, Takuyuki Uchida, Naoshi Nishida, Noriaki Tanaka, C. Richard Boland, Nagahide Matsubara
  • Journal Title: Int. J. Cancer (In press)
  • Peer Reviewed
• [Book] 大腸疾患NOW2008 (2008)
  • Author(s): 松原長秀(分担執筆)
  • Total Pages: 203
  • Publisher: 日本メディカルセンター
• [Patent(Industrial Property Rights)] メチル化核酸又は非メチル化核酸を増幅する方法 (2007)
  • Inventor(s): 永坂岳司, 松原長秀, 田中紀章, 笹本博美
  • Industrial Property Rights Holder: 岡山大学
  • Industrial Property Number: 特願2007-153086
  • Filing Date: 2007-06-08