2007 Fiscal Year Annual Research Report

プロテインホスファターゼを標的とした、肺癌の診断・治療開発のための研究

Research Project

Project/Area Number	19390370
Research Institution	Miyagi Cancer Center Research Institute
Principal Investigator	佐藤雅美 Miyagi Cancer Center Research Institute, 薬物療法学部, 特任研究員 (30250830)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	島礼宮城県立がんセンター(研究所), 薬物療法学部, 部長 (10196462) 田沼延公宮城県立がんセンター(研究所), 薬物療法学部, 研究員 (40333645) 野村美有樹宮城県立がんセンター(研究所), 薬物療法学部, 技師 (40390893)
Keywords	肺癌 / 前癌病変 / 早期肺癌 / HRM / プロテインホスファターゼ / 組織バンク / 遺伝子変異 / 遺伝子発現異常
Research Abstract	1.肺がん組織のホスファターゼ遺伝子の変異の同定のための実験 (1)前癌病変、早期肺癌、進行癌の生検、手術検体、胸水に関して、凍結保存を行った。 (2)上記サンプルからトータルRNAの抽出を行い、現在cDNAの合成を開始している。 (3)(1)と(2)のサンプルは、匿名化され、組織バンクとして管理されている。 (4)PT2,DSR,PPに属する全部で50のホスファターゼ遺伝子発現の解析のため、TaqManプローブを用いてのリアルタイムPCRの条件を設定中である。約半分のものに関しては完了。 (5)遺伝子変異を簡便・安価・短時間にスクリーニングするために、high resolution melting(HRM)システムを導入することとした。そのためのプライマーの合成が完了した。 2.細胞極性または小胞体輸送を標的とした癌治療 (1)低分子量2重基質性ホスファターゼの新しい分子種であるLDP4の機能を探るために2ハイブリッドスクリーニングをし、KIF3Aを結合することを明らかとした、さらにキネシン複合体との関係を検討し、LDP4がKIF3複合体に含まれることがわかった。 (2)LDP4により、KAP3が脱リン酸化されことを明らかとした。 3.スプライシングを標的とした癌治療 (1)PP1(セリンスレオニンプロテインボスファターゼtype1)が、NIPP1により核内(特にスプライシングのマシナリー)にターゲットされることを見出した。 (2)PP1/NIPP1複合体が、共発現させたベータグロビン遺伝子のスプライシングを阻害することを見出した。NIPP1のC末端欠損体を用いるとこの阻害作用が著しく増大することがわかった。 4.中心体を標的とした癌治療 PP6(セリンスレオニンプロテインホスファターゼtype6)が中心体に存在するタンパクであるCP110に結合して、中心体へとリクルートされることを見出した。